24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1098  |  回复: 12

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

[求助] 小分子蛋白交联之后如何分离,如何确定两种蛋白的连接效率?高效液相色谱分析可否 已有2人参与

我的实验主要是将一种小分蛋白与某种蛋白交联之后,怎样将未交联的小分子去除?以及如何分析是否所有的蛋白都交联上了小分子物质
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七夕小巫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你是小分子还是小蛋白?小分子可以用超滤,小蛋白可能要跑胶或者色谱
2楼2014-12-08 14:55:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 七夕小巫 at 2014-12-08 14:55:28
你是小分子还是小蛋白?小分子可以用超滤,小蛋白可能要跑胶或者色谱

哦,小蛋白1000道尔顿左右,如何验证我的蛋白是否与要交联的物质连接上了呢
3楼2014-12-08 15:19:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

有知道哪里可以做色谱分析的吗
4楼2014-12-08 15:20:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小益

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
这种蛋白如果需要活性纯化的化,可以使用SEC处理,很容易将小分子蛋白除去~~对于是否交联的确定可以用SDS-PAGE。当然如果你纯化了蛋白,质谱分析很容易的~~~
实验室小打杂
5楼2014-12-08 21:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

七夕小巫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

恩,楼上正解,质谱可以测出来,交联上分子量增加1000,如果交联上不一个还可以按分子量大致推算一下交联量
6楼2014-12-08 23:47:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by 刘小益 at 2014-12-08 21:31:50
这种蛋白如果需要活性纯化的化,可以使用SEC处理,很容易将小分子蛋白除去~~对于是否交联的确定可以用SDS-PAGE。当然如果你纯化了蛋白,质谱分析很容易的~~~

高效液相可以吗?凝胶排阻色谱
7楼2014-12-09 08:51:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 七夕小巫 at 2014-12-08 23:47:57
恩,楼上正解,质谱可以测出来,交联上分子量增加1000,如果交联上不一个还可以按分子量大致推算一下交联量

有没有更简便一些的方法,?我们目前做不了质谱分析,您知道哪里可以做吗?
8楼2014-12-09 08:59:32
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

刘小益

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

引用回帖:
7楼: Originally posted by zhengxichun at 2014-12-09 08:51:11
高效液相可以吗?凝胶排阻色谱...

SEC就是指的凝胶排阻色谱,如果你的交联量比较大,这个应该也可以~~但是凝胶排阻色谱的分辨率很低。当然你也可以这么做,将初始蛋白与交联后蛋白混合后走一个,如果出现两个峰那应该能说明你的东西接上去了
实验室小打杂
9楼2014-12-09 09:05:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

zhengxichun

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 刘小益 at 2014-12-09 09:05:46
SEC就是指的凝胶排阻色谱,如果你的交联量比较大,这个应该也可以~~但是凝胶排阻色谱的分辨率很低。当然你也可以这么做,将初始蛋白与交联后蛋白混合后走一个,如果出现两个峰那应该能说明你的东西接上去了...

谢谢!
10楼2014-12-09 09:26:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 zhengxichun 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 21:07 by peike
[考研] 材料工程专硕求调剂 +8 hyl3153942 2026-03-29 8/400 2026-03-30 20:45 by dophin1985
[考研] 279求调剂 +12 j的立方 2026-03-29 12/600 2026-03-30 20:30 by dick_runner
[考研] 材料科学与工程 317求调剂 +7 JKSOIID 2026-03-26 7/350 2026-03-30 20:10 by 滴滴上岸呀
[考研] 0703一志愿9,初试成绩:338,四六级已过,有科研经历,求调剂! +7 Zuhui0306 2026-03-25 7/350 2026-03-30 19:01 by 源_2020
[考研] 322求调剂 +10 宋明欣 2026-03-27 10/500 2026-03-30 18:47 by 544594351
[考研] 303求调剂 +7 DLkz1314. 2026-03-30 7/350 2026-03-30 16:05 by shuang5186
[考研] 085701求调剂初试286分 +5 secret0328 2026-03-28 5/250 2026-03-30 12:54 by fangnagu
[考研] 一志愿中南大学化学0703总分337求调剂 +6 niko- 2026-03-27 6/300 2026-03-30 10:25 by herarysara
[考研] 337求调剂 +6 《树》 2026-03-29 6/300 2026-03-30 10:15 by herarysara
[考研] 一志愿211,335分,0856,求调剂院校和导师 +7 倾____萧 2026-03-27 8/400 2026-03-30 09:37 by longlotian
[考研] 总分293求调剂 +8 加一一九 2026-03-25 11/550 2026-03-29 19:53 by 无际的草原
[考研] 考研调剂 +7 小蜡新笔 2026-03-29 7/350 2026-03-29 19:00 by 学员8dgXkO
[考研] 070305高分子化学与物理 304分求调剂 +12 c297914 2026-03-28 12/600 2026-03-29 16:21 by Serene1974
[考研] 315求调剂 +4 akie... 2026-03-28 5/250 2026-03-28 21:05 by zhq0425
[考研] 283求调剂 +7 A child 2026-03-28 7/350 2026-03-28 12:05 by zllcz
[考研] 求调剂 +4 零八# 2026-03-27 4/200 2026-03-27 18:07 by yu221
[考研] 调剂 +3 李嘉图·S·路 2026-03-27 3/150 2026-03-27 11:19 by wangjy2002
[考研] 打过很多竞赛,085406控制工程300分,求调剂 +3 askeladz 2026-03-26 3/150 2026-03-26 09:08 by 给你你注意休息
[考研] 一志愿武理085500机械专业总分300求调剂 +3 an10101 2026-03-24 7/350 2026-03-25 00:00 by 山鬼0-
信息提示
请填处理意见