应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

Znn3bq.jpeg
小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问各位大虾，做western时，分子量为21的蛋白用多大的分离胶呢？请赐教~~~~
111/2返回列表12下一页
查看: 4220  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cathy521125

银虫 (初入文坛)

[求助] 请问各位大虾，做western时，分子量为21的蛋白用多大的分离胶呢？请赐教~~~~ 已有3人参与

小女子初做western，目的蛋白分子量为21，听很多人说分子量越大或是越小的蛋白不好跑，请问各位虫友、大侠们，你们在做小分子量目的蛋白的时候，分离胶时如何选择的呢？选择12%还是15%的呢？我的PVDF膜是0.2um的，蛋白应该是跑不过去的哈？还需不需要加大SDS的用量呢？
    请各位虫友、大虾们赐教，不胜感激！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-27 16:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

overhalfmoon

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 21:17:02
用12％，0.2um的膜孔径大小相当于19KD蛋白，所以转膜不用担心

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-12-27 17:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

剑客心语

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 21:16:54
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h
赞一下(1人) 回复此楼
一柄驻剑，一朝旅人，一颗常心，一生志言……行疆漫漫，品味一生……
2楼2013-12-27 16:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

缤纷惠儿

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 剑客心语 at 2013-12-27 16:35:57
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h

20-30的蛋白用10%的胶肯定分不开，10%分离35—90的蛋白，一般20多的用12%的胶。
赞一下(1人) 回复此楼
吃亏是福，好人有好报
6楼2013-12-27 18:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

缤纷惠儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cathy521125 at 2013-12-27 18:16:47
好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？...

用12%的肯定能分离出来
赞一下(1人) 回复此楼
吃亏是福，好人有好报
7楼2013-12-27 18:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

剑客心语

木虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-29 00:15:25
引用回帖:
4楼: Originally posted by cathy521125 at 2013-12-27 18:16:47
好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？...

我曾经跑过一个25kDa的蛋白，10%的分离胶做出信号了。我的经验是大小在 10~20kd，浓缩胶10%，分离胶12%；20~80kDa，浓缩胶5%，分离胶10%。如果10%不可以，也可以试试12%。
赞一下(1人) 回复此楼
一柄驻剑，一朝旅人，一颗常心，一生志言……行疆漫漫，品味一生……
9楼2013-12-28 23:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 剑客心语 at 2013-12-27 16:35:57
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h

好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-27 18:16:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by overhalfmoon at 2013-12-27 17:49:18
用12％，0.2um的膜孔径大小相当于19KD蛋白，所以转膜不用担心

灰常感谢
回复此楼
5楼2013-12-27 18:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 缤纷惠儿 at 2013-12-27 18:24:02
20-30的蛋白用10%的胶肯定分不开，10%分离35—90的蛋白，一般20多的用12%的胶。...

那电泳80V、400mA，转膜300V、200mA，2小时，可以吗？
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-27 18:43:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿凡的小开
感谢分享
10楼2013-12-30 19:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cathy521125 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 344求调剂 +7 丶风雪夜归人丶 2026-04-09 7/350 2026-04-10 12:05 by pengliang8036
[考研] 一志愿华东师范生物学326分，求调剂 +8 刘墨墨 2026-04-09 8/400 2026-04-10 12:00 by pengliang8036
[考研] 求调剂 +9 翩翩一书生 2026-04-09 9/450 2026-04-10 11:43 by wp06
[考研] 化工调剂求导师收留！一志愿失利，踏实肯干，有植物提取科研经历 +17 yzyzx 2026-04-09 17/850 2026-04-10 10:29 by wp06
[考研] 316求调剂 +3 想读研究生( ?∵ 2026-04-07 3/150 2026-04-09 17:31 by wp06
[考研] 本科郑州大学，一志愿华东师范大学282求调剂 +23 熊哥xtk 2026-04-07 26/1300 2026-04-09 17:17 by 18446523
[考研] 086004 求调剂 309 +7 Yin DY 2026-04-08 7/350 2026-04-09 13:59 by Delta2012
[考研] 328求调剂 +17 lftmya 2026-04-07 18/900 2026-04-09 08:05 by 5268321
[考研] 求调剂 +8 吃口冰激凌 2026-04-07 8/400 2026-04-09 08:03 by 5268321
[考研] 求调剂 +28 111623 2026-04-04 33/1650 2026-04-08 09:24 by 泽润东方
[考研] 338求调剂 +8 wxygxsaaaaa 2026-04-06 8/400 2026-04-08 06:58 by 无际的草原
[考研] 调剂求助（生物与医药） +6 @6952 2026-04-06 6/300 2026-04-07 23:52 by lys0704
[考研] 316求调剂 +4 15318418673 2026-04-07 4/200 2026-04-07 22:12 by hemengdong
[考研] 307求调剂 +3 Youth@@ 2026-04-07 3/150 2026-04-07 22:00 by hemengdong
[考研] 287分求调剂 有专利国奖一志愿哈工大085406 +6 白易辰 2026-04-06 7/350 2026-04-06 22:46 by 875465
[考研] 332求调剂 +17 小小孟... 2026-04-05 18/900 2026-04-06 09:51 by 蓝云思雨
[考研] 284求调剂 +7 徐同学_001 2026-04-04 13/650 2026-04-05 17:19 by yulian1987
[考研] 085602调剂 初试总分335 +12 19123253302 2026-04-04 12/600 2026-04-05 08:08 by 544594351
[考研] 323求调剂 +8 李佳乐1 2026-04-04 8/400 2026-04-04 22:26 by hemengdong
[考研] 266求调剂 +8 学员97LZgn 2026-04-03 8/400 2026-04-04 09:02 by 20021109
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭