应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 请问各位大虾，做western时，分子量为21的蛋白用多大的分离胶呢？请赐教~~~~
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
111/2返回列表12下一页
查看: 4177  |  回复: 10
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

cathy521125

银虫 (初入文坛)

[求助] 请问各位大虾，做western时，分子量为21的蛋白用多大的分离胶呢？请赐教~~~~ 已有3人参与

小女子初做western，目的蛋白分子量为21，听很多人说分子量越大或是越小的蛋白不好跑，请问各位虫友、大侠们，你们在做小分子量目的蛋白的时候，分离胶时如何选择的呢？选择12%还是15%的呢？我的PVDF膜是0.2um的，蛋白应该是跑不过去的哈？还需不需要加大SDS的用量呢？
    请各位虫友、大虾们赐教，不胜感激！！！
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2013-12-27 16:16:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

overhalfmoon

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 21:17:02
用12％，0.2um的膜孔径大小相当于19KD蛋白，所以转膜不用担心

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
赞一下(2人) 回复此楼
3楼2013-12-27 17:49:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

剑客心语

木虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-28 21:16:54
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h
赞一下(1人) 回复此楼
一柄驻剑，一朝旅人，一颗常心，一生志言……行疆漫漫，品味一生……
2楼2013-12-27 16:35:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

缤纷惠儿

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
2楼: Originally posted by 剑客心语 at 2013-12-27 16:35:57
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h

20-30的蛋白用10%的胶肯定分不开，10%分离35—90的蛋白，一般20多的用12%的胶。
赞一下(1人) 回复此楼
吃亏是福，好人有好报
6楼2013-12-27 18:24:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

缤纷惠儿

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by cathy521125 at 2013-12-27 18:16:47
好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？...

用12%的肯定能分离出来
赞一下(1人) 回复此楼
吃亏是福，好人有好报
7楼2013-12-27 18:24:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

剑客心语

木虫 (小有名气)
★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2013-12-29 00:15:25
引用回帖:
4楼: Originally posted by cathy521125 at 2013-12-27 18:16:47
好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？...

我曾经跑过一个25kDa的蛋白，10%的分离胶做出信号了。我的经验是大小在 10~20kd，浓缩胶10%，分离胶12%；20~80kDa，浓缩胶5%，分离胶10%。如果10%不可以，也可以试试12%。
赞一下(1人) 回复此楼
一柄驻剑，一朝旅人，一颗常心，一生志言……行疆漫漫，品味一生……
9楼2013-12-28 23:09:18
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 剑客心语 at 2013-12-27 16:35:57
分子量为20多-30多的蛋白，我一般用10%的分离胶。SDS的用量不必过大。转膜：200mA 1.5h-2.0h

好的，谢谢，我用10%的跑过，可是没跑出来，你当时跑的蛋白分子量是多少啊？跑出来了吗？
赞一下 回复此楼
4楼2013-12-27 18:16:47
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
3楼: Originally posted by overhalfmoon at 2013-12-27 17:49:18
用12％，0.2um的膜孔径大小相当于19KD蛋白，所以转膜不用担心

灰常感谢
回复此楼
5楼2013-12-27 18:17:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cathy521125

银虫 (初入文坛)
引用回帖:
6楼: Originally posted by 缤纷惠儿 at 2013-12-27 18:24:02
20-30的蛋白用10%的胶肯定分不开，10%分离35—90的蛋白，一般20多的用12%的胶。...

那电泳80V、400mA，转膜300V、200mA，2小时，可以吗？
赞一下 回复此楼
8楼2013-12-27 18:43:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

阿凡的小开
感谢分享
10楼2013-12-30 19:22:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 cathy521125 的主题更新
111/2返回列表12下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 材料与化工272求调剂 +16 阿斯蒂芬2004 2026-03-28 16/800 2026-03-29 22:57 by tantai88888
[考研] 一志愿河北工业大学0817化工278分求调剂 +10 jhybd 2026-03-23 15/750 2026-03-29 21:49 by nanaliuyun
[考研] 南京大学化学调剂 +9 景随风 2026-03-29 14/700 2026-03-29 21:22 by chixmc
[考研] 296求调剂 +6 彼岸t 2026-03-29 6/300 2026-03-29 20:22 by 永字号
[考研] 291求调剂 +7 Y-cap 2026-03-29 8/400 2026-03-29 19:53 by klasasda
[考研] 化学工程085602 305分求调剂 +22 RichLi_ 2026-03-25 22/1100 2026-03-29 19:51 by 无际的草原
[考研] 318一志愿吉林大学生物与医药 求调剂 +4 笃行致远. 2026-03-28 4/200 2026-03-29 11:55 by longlotian
[考研] 329求调剂 +7 星野? 2026-03-26 7/350 2026-03-29 06:43 by 544594351
[考研] 复试调剂 +3 raojunqi0129 2026-03-28 3/150 2026-03-28 15:27 by 落睿可思
[考研] 311求调剂 +3 希望上岸阿小杨 2026-03-23 3/150 2026-03-28 07:57 by 热情沙漠
[考研] 化学调剂 +4 爱吃番茄的旭 2026-03-24 5/250 2026-03-27 17:50 by kiokin
[考研] 286求调剂 +4 lim0922 2026-03-26 4/200 2026-03-27 10:28 by guoweigw
[考研] 304材料求调剂 +4 钟llll 2026-03-26 4/200 2026-03-27 03:42 by wxiongid
[考研] 0703化学求调剂 +3 丹青奶盖 2026-03-26 5/250 2026-03-26 20:11 by macy2011
[考研] 总分322求生物学/生化与分子/生物信息学相关调剂 +5 星沉uu 2026-03-26 6/300 2026-03-26 19:02 by macy2011
[考研] 化学调剂一志愿上海交通大学336分-本科上海211 +4 小鱼爱有机 2026-03-25 4/200 2026-03-26 10:19 by aa331100
[考研] 332求调剂 +6 032500 2026-03-25 6/300 2026-03-25 22:45 by 418490947
[考研] 一志愿南航 335分 | 0856材料化工 | GPA 4.07 | 有科研经历 +6 cccchenso 2026-03-23 6/300 2026-03-25 22:25 by 544594351
[考研] 机械学硕总分317求调剂！！！！ +4 Acaciad 2026-03-25 4/200 2026-03-25 19:59 by hanserlol
[考研] 一志愿重庆大学085700资源与环境，总分308求调剂 +7 墨墨漠 2026-03-23 8/400 2026-03-23 20:36 by Creta
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭