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用福林酚法测蛋白质相关问题求助 已有1人参与
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1.之前一直用考马斯亮蓝和凯氏定氮测蛋白质，查文献发现福林酚主要是测水溶性蛋白，没做过具体的，请问是否可靠？ 2.国标福林酚试剂分为A，B两种，实验室之前有买过福林酚试剂，请问这两种有什么区别？只需要把福林酚试剂稀释就可以用了吗？ |
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guoliwang
至尊木虫 (职业作家)
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【答案】应助回帖
感谢参与，应助指数 +1
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一般称Lowry法，定量比其它常用方法更准确些。你随便搜搜就能找到很详细的步骤。你也可以直接买试剂盒。 你说的A试剂应该是下面的混合液甲，B试剂是Folin-酚。 原理：磷钼酸和磷钨酸在碱性条件下，易被酚类化合物还原而呈蓝色反应．蛋白质中含有代酚基的酪氨酸，故有此反应．Folin---酚法的灵敏度是双缩脲法的100倍． 试剂：一：1，4%碳酸钠；2，0.2N氢氧化钠；3，1%硫酸铜；4,2%酒石酸钾钠。1和2等体积混合，3和4等体积混合，然后在实验前将两液以50：1混合(甲)。二：1NFolin--酚试剂(乙)。 方法：标准曲线；试管中加0、0.2、0.40、0.60、1.00毫升酪蛋白溶液（500微克/毫升），加水补足1毫升，平行做两份。按序各加5毫升试剂（甲），摇匀，室温置放10分钟，再依次加入1N（0.5毫升）Folin----酚试剂（乙），摇匀，30摄氏度保温30分钟。然后在分光光度机上比色测定（A500）。待测样品如上反应和测定，对照标准曲线，得出含量。 |
2楼2014-12-08 21:00:42
3楼2014-12-10 18:34:50
4楼2017-04-30 09:48:49