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1楼2014-12-04 22:28:02

xiaoweiwei121

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【答案】应助回帖

引用回帖:

6楼: Originally posted by zoe回望 at 2014-12-05 09:28:49
temed是自己配的，买的是纯的。10%ap 我一般加的是两倍，因为那样的快些。我们实验室只有我老师喊我在做这个蛋白质，其他基本都是DNA，还有，我用自己的试剂是跑不出来，用之前师兄的试剂就是胶不凝（可能是试剂配 ...

缓冲液和sds配好了放四度一年没什么问题，10%ap -20度一个月没问题。丙烯酰胺溶液用过4个月的没问题。胶不凝，一般就是ap 或者temed 的问题
你的胶上marker都看不到，是你没有放还是没跑出来。如果没跑出来，你的配方或者溶液就有大问题
曾经有一段时间撞墙期，胶怎么跑也不咋地。到最后换了sds，问题再也没出现过

8楼2014-12-05 13:31:41

查看全部 27 个回答

867575969

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【答案】应助回帖

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-12-05 13:04:26
zoe回望: 金币+1, ★有帮助 2014-12-09 21:58:38

分离胶浓度一般都是根据所跑蛋白大小确定的，一般全蛋白用14%即可，不知lz浓缩胶和分离胶跑的电压和时间分别是多少？看lz的图，貌似都没跑开！另外考染一般时间较长需过夜，分辨率没银染高，但考染背景较低，图像较清晰。

有些东西因为得不到而变得美好，有些东西因为拥有而变得弥足珍贵！

2楼2014-12-04 23:11:00

xiaoweiwei121

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-12-05 13:04:30

换配方，换试剂吧
如果做了几块胶，都不出结果，基本就不用再做了，楼主用的配方和我用的有点差别，10%ap 用量就不一样
还有10%temed，我们直接用的temed，不知道你们是买来就是10%的还是其他。其他的也不太一样，
如果你想确认一下，是你的配方问题，还是你的试剂问题，不妨去你们临近的实验室做做看

3楼2014-12-05 06:42:31

zuozicong

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kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-12-05 13:04:34
zoe回望: 金币+1, ★有帮助 2014-12-09 21:59:00

如果配胶和电泳试剂没问题的话，估计是样品处理的问题，样品是否残留强极性强电离的有机酸或离液剂，比如TCA或盐酸胍，以前遇到过。溴酚蓝跑着跑着就变黄了。不知道你的样品是怎么处理的？

[ 发自小木虫客户端 ]

学而时习之

4楼2014-12-05 07:26:35