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zdwxxw

至尊木虫 (著名写手)

[求助] 重组蛋白为什么分子量变为原来的3倍了? 已有5人参与

如题,原来的蛋白表达出来是15kda左右,跟理论值一致,为什么改变了一些密码子之后,表达出来的东西是45kda左右?关键是生物活性跟原来的一样,是不是变成了二聚体或者三聚体了?有木有遇到类似情况的虫友,怎么破?
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sadc

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

引用回帖:
2楼: Originally posted by langzian at 2014-09-28 18:50:34
SDS_PAGE 是不会有二聚体的,除非二硫键,你可以变性电泳试试

SDS-PAGE的时候,仍然会有很多二聚体、三聚体,SDS本身就是变性的,可以再通过加盐酸胍等更强烈的变性剂处理看一下。
6楼2014-10-03 09:03:50
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langzian

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-29 11:17:41
zdwxxw: 金币+5, 有帮助, 恩呢,我看看 2014-09-29 20:50:43
SDS_PAGE 是不会有二聚体的,除非二硫键,你可以变性电泳试试

[ 发自小木虫客户端 ]
江山
2楼2014-09-28 18:50:34
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)


【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-29 11:17:44
zdwxxw: 金币+5, 有帮助, 恩恩,找找文献看看 2014-09-29 20:51:44
三聚体,一般是这个原因,sds有时不能完全打开四级结构的

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-09-28 19:00:07
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ccandcc

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+1, 鼓励交流 2014-09-29 11:17:48
zdwxxw: 金币+5, 有帮助, 哦哦,我试试哈 2014-09-29 20:50:19
进样之前多煮沸一会,我觉得是没完全打开
4楼2014-09-29 10:22:06
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