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重组蛋白为什么分子量变为原来的3倍了?
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zdwxxw
至尊木虫
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专业: 微生物遗传育种学
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重组蛋白为什么分子量变为原来的3倍了?
已有5人参与
如题,原来的蛋白表达出来是15kda左右,跟理论值一致,为什么改变了一些密码子之后,表达出来的东西是45kda左右?关键是生物活性跟原来的一样,是不是变成了二聚体或者三聚体了?有木有遇到类似情况的虫友,怎么破?
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【求助/交流】同样分子量的蛋白,用Strip buffer来洗掉前一个再检测效果如何?
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踏踏实实做好自己,其他的事与你无关。
1楼
2014-09-28 16:58:38
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ccandcc
木虫
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2014-09-29 11:17:48
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有帮助, 哦哦,我试试哈
2014-09-29 20:50:19
进样之前多煮沸一会,我觉得是没完全打开
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4楼
2014-09-29 10:22:06
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langzian
木虫
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2014-09-29 11:17:41
zdwxxw: 金币+5,
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有帮助, 恩呢,我看看
2014-09-29 20:50:43
SDS_PAGE 是不会有二聚体的,除非二硫键,你可以变性电泳试试
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江山
2楼
2014-09-28 18:50:34
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专业: 病原细菌与放线菌生物学
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kx444555: 金币+1, 鼓励交流
2014-09-29 11:17:44
zdwxxw: 金币+5,
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有帮助, 恩恩,找找文献看看
2014-09-29 20:51:44
三聚体,一般是这个原因,sds有时不能完全打开四级结构的
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3楼
2014-09-28 19:00:07
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冼亮淀粉酶
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专业: 环境微生物学
管辖:
微生物
估计是你优化密码子的时候搞错了,氨基酸突变成有糖链的了。
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流星来时我许了个愿,愿我有吃有喝还有舒服的猪圈。讨厌发帖前不搜索论坛重复发帖和仅把论坛当解决问题工具,久不看论坛一来就提问者,宁弃EPI和VIP也不回帖。
5楼
2014-10-02 00:17:35
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