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Crisy

铜虫 (初入文坛)

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[求助] 定点突变过程中出现多整合进一段基因序列进去要如何解决呢？已有1人参与

大家好，我在做定点突变的时候会有多整合一段基因进去，请问为什么会出现这种现象？要如何解决呢？我看了一篇文献中说完全重叠的引物会出现这种引物整合现象，然后我把引物设计成那种部分重叠25个碱基的引物，但是这两次还是出现了多插入一段基因的情况。请大家帮我分析下。

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Crisy

1楼 2014-09-06 11:33:51

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lxj341401

至尊木虫 (著名写手)

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【答案】应助回帖

★ ★
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Crisy(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-09-06 22:53:10

做PCR的时候降低循环次数，20－25次。
还有一个方法更简单，不用重新PCR，原来的平板里面重新挑两三个菌去测序。并不是所有的都多了一段基因的。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]

赞一下(1人)

2楼2014-09-06 22:24:58

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