| 查看: 2309 | 回复: 2 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
dwhhzhang捐助贵宾 (正式写手)
|
[求助]
ELISA检测蛋白相互作用。
|
|
|
各位大侠，救命啊。鄙人用ELISA检测蛋白质相互作用，就是测不出来。我的protocol如下： 1 Coat the microplate with the first protein at 37℃ for 3 h ; 2 Block the plate with 3% BSA at 37℃ for 2 h; 3 The second protein with GST-tag was added to each well, incubated for 2 h at 37℃, then wash twice with PBS ; 4 Add anti-GST Biotin conjugated (diluted 1:1000) in PBS-0.05% Tween-20, and incubated at 37℃ for 1 h, and then washed three times in PBS-0.05% Tween-20; 5 Add Streptavidin conjugated Alkaline Phosphatase in PBS-0.05% Tween-20,and incubated at 37℃ for 1 h, and then washed three times in PBS-0.05% Tween-20; 6 The color reaction was developed with p-NPP. 7 Stop the reaction and teh absorbance was read by a microplate reader at 405nm. 似乎蛋白之间的相互作用很弱，经不起折腾，有哪位大侠有成功经验或好的建议，帮帮我吧。另外，我现在只能用ELISA，其他方法条件不具备。 跪谢了！ |
回复此楼» 猜你喜欢
PRMT5·MTA 抑制剂 MRTX1719 的科研应用
已经有0人回复
-
SW033291 科研使用解析：分子特征、储存与实验获取要点
已经有0人回复
-
化学工程及工业化学论文润色/翻译怎么收费?
已经有201人回复
-
泛 RAS 抑制新思路：大环肽拟似物如何同时牵住突变型与野生型 RAS？
已经有0人回复
-
TYK2/JAK1 双靶点工具化合物 Brepocitinib：激酶选择性、研究进展与实验应用全解析
已经有0人回复
-
矢车菊素-3-O-葡萄糖苷质控实录：从一张HPLC图谱读懂纯度与稳定性
已经有0人回复
-
恩诺沙星（Enrofloxacin）科研解析：分子特征、LC-MS/MS 检测与实验室使用要点
已经有0人回复
-
Calderasib理化性质与实验操作技术笔记
已经有0人回复
-
RMC-6291怎么用？RAS(ON) 三重复合物工具化合物的实验室实操要点
已经有0人回复
-
苯并呋咱全解析：NBD 荧光衍生化试剂母核的化学特性与实验室应用
已经有0人回复
-
生物质炭与活化剂氢氧化钾混合注意事项
已经有0人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- 蛋白质相互作用研究 蛋白A能pull-down蛋白B 反之检测不出
已经有22人回复
- 求助预测目的蛋白与某一蛋白相互作用位点使用什么软件或在线工具啊？
已经有10人回复
- APG-1387新药据说是基于“蛋白-蛋白相互作用”的小分子细胞毒类抗肿瘤药。
已经有10人回复
- 请教gromacs蛋白与小分子相互作用分析
已经有12人回复
- 蛋白之间相互作用的残基及作用力
已经有3人回复
- western-blot的问题！！！
已经有5人回复
- 胞外蛋白质相互作用的方法
已经有17人回复
- westernblot 目标蛋白无条带
已经有9人回复
- 急！待毕业！使用ELISA检测血清中抗体滴度，包被时的抗原可以不与载体蛋白偶联吗？
已经有14人回复
- 蛋白刺激RAW264.7，Elisa检测TNF-α的释放
已经有25人回复
- 蛋白质相互作用预测
已经有9人回复
- 请问有人做过分泌蛋白的Western/Elisa检测么？
已经有6人回复
- 【求助】如何探究两个蛋白质之间的直接或间接相互作用？谢谢！
已经有6人回复
- 【求助/交流】求助 免疫共沉淀实验
已经有20人回复
- 【求助/交流】关于ELISA中，使用封闭蛋白的问题
已经有8人回复
- 【求助/交流】请问用RIPA裂解液裂解后的蛋白能做ELISA吗？
已经有6人回复
- 【求助/交流】请教高人：GST-pull down找出B蛋白和A蛋白相互作用，下游实验要怎么做啊
已经有4人回复
- 【分享】蛋白质功能分析技术
已经有32人回复
- Western Blot 磷酸化蛋白测定问题
已经有9人回复
2012chen
新虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3171.3
- 散金: 2879
- 红花: 22
- 帖子: 3032
- 在线: 236.2小时
- 虫号: 2319145
- 注册: 2013-03-05
- 性别: GG
- 专业: 抗感染药物药理
3楼2018-10-19 14:48:23
2012chen
新虫 (职业作家)
- 应助: 0 (幼儿园)
- 金币: 3171.3
- 散金: 2879
- 红花: 22
- 帖子: 3032
- 在线: 236.2小时
- 虫号: 2319145
- 注册: 2013-03-05
- 性别: GG
- 专业: 抗感染药物药理
2楼2018-10-19 14:47:58
200