应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 发酵/表达 » 大肠杆菌发酵优化
231/3返回列表123下一页
查看: 4843  |  回复: 22
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

hehongyu

木虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌发酵优化 已有19人参与

小弟现在在做大肠杆菌发酵，基础培养基是LB培养基，37℃培养。OD反弹后菌浓约为6%，降温至24℃，加入IPTG，补加50%甘油诱导20h左右，最后菌浓为12%，酶活为50多。

现在想努力提高菌体浓度，想请教下各位：1）大肠的最高浓度可以达到多少？ 2）是否在基础培养基耗完之后，补加甘油，使菌体量升高，再加入IPTG诱导？

请各位不吝赐教！
回复此楼

» 本帖已获得的红花（最新10朵）

bics1125

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-08-31 12:56:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

ls2046

铁杆木虫 (职业作家)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
给你一篇文嫌，OD能干到160，硕士论文《大肠杆菌高密度发酵研究》，丁兰宝，江南大学。里面有配方，可以参考哦。
赞一下(2人) 回复此楼
一品黄山
16楼2015-08-06 12:34:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hanjun80

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
嗯，大肠杆菌如果培养基成本不计的话，OD可以达到160（发酵过程不通入任何高浓度氧）。
如果用无机盐培养基的话，OD到100已经很不错了
楼主你说的12%是湿重比例吧？这个受菌泥含水量影响的
赞一下(1人) 回复此楼
我笃信:人定胜天！
6楼2014-09-02 10:09:04
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hunter1984

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们也只说OD600,12%是湿重比例吗？以前我们可以做到OD600到120，但培养基设计比较复杂，大肠杆菌只是一个表达载体，OD600能不能做到还得考虑你最终表达的产品，对大肠杆菌的负担有多大。有些产品根本就做不到高密度，我接触的一家生物药厂的OD600才做到7，但照样挣钱。所以楼主你应该把最终表达的产品说下，才能借鉴相似的产品给予你回复
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-09-03 08:54:17
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

无限美好

金虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
7楼: Originally posted by hunter1984 at 2014-09-03 08:54:17
我们也只说OD600,12%是湿重比例吗？以前我们可以做到OD600到120，但培养基设计比较复杂，大肠杆菌只是一个表达载体，OD600能不能做到还得考虑你最终表达的产品，对大肠杆菌的负担有多大。有些产品根本就做不到高密度 ...

葡萄糖氧化酶GDH和酮还原酶KRED在培养时OD可以达150，但是酶活低，请问有什么方法可以使大肠杆菌高效率表达吗？谢谢
赞一下(1人) 回复此楼
未婚
13楼2014-11-17 22:25:38
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
12%的菌浓就不低了啊，

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
2楼2014-08-31 13:31:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hehongyu

木虫 (正式写手)
引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-31 13:31:50
12%的菌浓就不低了啊，

我想能不能提高到16 ~18%呢
赞一下 回复此楼
3楼2014-08-31 13:39:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

考拉003

新虫 (小有名气)
★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助！ 2014-09-02 09:48:19
你这是做表达还是做甘油利用实验？我们菌浓度都谈OD，不算百分数啊。od600最高到20多吧
赞一下 回复此楼
不是微生物专业的却进入微生物行业
4楼2014-09-02 01:07:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

laozuzunzhe

铁杆木虫 (著名写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
一般说OD或浊度，OD600不止20，可以再翻几倍。
赞一下 回复此楼
5楼2014-09-02 09:48:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

cjm415

银虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
1：OD一般都可以到80以上的，记得好像有人说好像最高能到达200以上吧。
2：一般是在起始培养基碳源耗尽后，进行一段流加到达所需要的OD值进行诱导，但是并不是OD值越高诱导越好的。具体的你自己可以摸索。
我也想请教你一个问题： 你做的应该是可溶表达的吧，请问为什么温度要选择24度并且诱导20h那么久啊。
赞一下 回复此楼
Sinogeneclon CO.,Ltd
8楼2014-09-03 23:02:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a2703521

金虫 (小有名气)

123
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
发酵罐补料培养，做到最高的OD有200左右
赞一下 回复此楼
9楼2014-09-28 09:31:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

181587941

金虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我们的每次发酵到OD=150以上，就放罐，但还在长，估计能长到200的，只是没必要，工业放大做不到的。100L的罐做到150的OD没问题，你说的菌浓在200g/L以上，不同的菌种还不一样，有些更高。
赞一下 回复此楼
10楼2014-10-29 12:01:36
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 hehongyu 的主题更新
231/3返回列表123下一页
普通表情 龙 兔 虎 猫 高级回复 (可上传附件)
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 321求调剂 +3 何润采123 2026-03-18 3/150 2026-03-18 21:27 by li123456789.
[考研] 一志愿天津大学化学工艺专业（081702）315分求调剂 +10 yangfz 2026-03-17 10/500 2026-03-18 20:14 by walc
[考研] 344求调剂 +6 knight344 2026-03-16 7/350 2026-03-18 20:13 by walc
[考研] 材料专硕英一数二306 +4 z1z2z3879 2026-03-18 4/200 2026-03-18 20:00 by 楤哥
[考研] 化学工程321分求调剂 +15 大米饭！ 2026-03-15 18/900 2026-03-18 14:52 by haxia
[考研] 314求调剂 +8 无懈可击的巨人 2026-03-12 8/400 2026-03-18 14:50 by haxia
[考研] 311求调剂 +6 26研0 2026-03-15 6/300 2026-03-18 14:43 by haxia
[考研] 一志愿西南交大，求调剂 +4 材化逐梦人 2026-03-18 4/200 2026-03-18 14:22 by 007_lilei
[考研] 0703化学调剂 +3 妮妮ninicgb 2026-03-17 3/150 2026-03-18 10:29 by macy2011
[考研] 211本，11408一志愿中科院277分，曾在中科院自动化所实习 +6 Losir 2026-03-12 7/350 2026-03-17 12:09 by danranxie
[考研] 一志愿211 0703方向310分求调剂 +3 努力奋斗112 2026-03-15 3/150 2026-03-16 16:44 by houyaoxu
[考研] 283求调剂 +10 小楼。 2026-03-12 14/700 2026-03-16 16:08 by 13811244083
[考研] 0856求调剂 +3 刘梦微 2026-03-15 3/150 2026-03-16 10:00 by houyaoxu
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 中科大材料专硕319求调剂 +3 孟鑫材料 2026-03-13 3/150 2026-03-14 18:10 by houyaoxu
[基金申请] 现在如何回避去年的某一个专家，不知道名字 +3 zk200107 2026-03-12 6/300 2026-03-14 17:13 by zk200107
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料专硕350 求调剂 +4 王金科 2026-03-12 4/200 2026-03-13 16:02 by ruiyingmiao
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +3 d如愿上岸 2026-03-13 3/150 2026-03-13 10:43 by houyaoxu
[考博] 26读博 +4 Rui135246 2026-03-12 10/500 2026-03-13 07:15 by gaobiao
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭