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hehongyu

木虫 (正式写手)

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[交流] 大肠杆菌发酵优化已有19人参与

小弟现在在做大肠杆菌发酵，基础培养基是LB培养基，37℃培养。OD反弹后菌浓约为6%，降温至24℃，加入IPTG，补加50%甘油诱导20h左右，最后菌浓为12%，酶活为50多。

现在想努力提高菌体浓度，想请教下各位：1）大肠的最高浓度可以达到多少？ 2）是否在基础培养基耗完之后，补加甘油，使菌体量升高，再加入IPTG诱导？

请各位不吝赐教！

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bics1125

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1楼 2014-08-31 12:56:30

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无限美好

金虫 (小有名气)

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引用回帖:

7楼: Originally posted by hunter1984 at 2014-09-03 08:54:17
我们也只说OD600,12%是湿重比例吗？以前我们可以做到OD600到120，但培养基设计比较复杂，大肠杆菌只是一个表达载体，OD600能不能做到还得考虑你最终表达的产品，对大肠杆菌的负担有多大。有些产品根本就做不到高密度 ...

葡萄糖氧化酶GDH和酮还原酶KRED在培养时OD可以达150，但是酶活低，请问有什么方法可以使大肠杆菌高效率表达吗？谢谢