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hehongyu

木虫 (正式写手)

[交流] 大肠杆菌发酵优化 已有19人参与

小弟现在在做大肠杆菌发酵,基础培养基是LB培养基,37℃培养。OD反弹后菌浓约为6%,降温至24℃,加入IPTG,补加50%甘油诱导20h左右,最后菌浓为12%,酶活为50多。

现在想努力提高菌体浓度,想请教下各位:1)大肠的最高浓度可以达到多少? 2)是否在基础培养基耗完之后,补加甘油,使菌体量升高,再加入IPTG诱导?

请各位不吝赐教!
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cjm415

银虫 (初入文坛)


小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
1:OD一般都可以到80以上的,记得好像有人说好像最高能到达200以上吧。
2:一般是在起始培养基碳源耗尽后,进行一段流加到达所需要的OD值进行诱导,但是并不是OD值越高诱导越好的。具体的你自己可以摸索。
我也想请教你一个问题: 你做的应该是可溶表达的吧,请问为什么温度要选择24度并且诱导20h那么久啊。
Sinogeneclon CO.,Ltd
8楼2014-09-03 23:02:35
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bio_sci

捐助贵宾 (正式写手)



小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
12%的菌浓就不低了啊,

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-08-31 13:31:50
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hehongyu

木虫 (正式写手)

引用回帖:
2楼: Originally posted by bio_sci at 2014-08-31 13:31:50
12%的菌浓就不低了啊,

我想能不能提高到16 ~18%呢
3楼2014-08-31 13:39:06
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考拉003

新虫 (小有名气)

★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
laozuzunzhe: 金币+2, 鼓励应助! 2014-09-02 09:48:19
你这是做表达还是做甘油利用实验?我们菌浓度都谈OD,不算百分数啊。od600最高到20多吧
不是微生物专业的却进入微生物行业
4楼2014-09-02 01:07:53
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