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【新手请教】纯化后的蛋白可以做哪些实验?
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NanHao1991
铜虫
(初入文坛)
应助: 1
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虫号: 2227738
注册: 2013-01-07
性别: GG
专业: 生物化学
[
求助
]
【新手请教】纯化后的蛋白可以做哪些实验?
已有1人参与
目前我在实验室纯化出一个蛋白,带有标签,大部分(约60-70%)为可溶性蛋白,反复冻融(3次)没有沉淀。
但是,切除标签后,目标蛋白的量太少了,分析是因为融合蛋白中的酶切位点空间上不能完全暴露给蛋白酶。
目前,一方面在研究如何增加蛋白产量(切除标签后的目标蛋白)供后期NMR解析三维结构,另一方面,也想用可溶性融合蛋白做一些其他实验。
本人是新手没做过什么实验,请问这种情况下能做点什么实验呢
?我想到的是pull-down,还请大家多说说。
另,本实验室具备的条件:一般的分子生物学仪器、试剂;教简陋的蛋白纯化系统;细胞间(Mar145,293T,sf9等细胞)。
拜托大家了!!!
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Talentisenduring***
1楼
2014-08-27 13:31:25
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我欲乘风归去
木虫
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在线: 878.8小时
虫号: 3340869
注册: 2014-07-27
性别: GG
专业: 植物生理与生化
【答案】应助回帖
感谢参与,应助指数 +1
可以做下戊二醛交联实验 检测下蛋白是不是以多聚体形式存在
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。
2楼
2014-08-29 16:00:49
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