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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 多重PCR加引物的问题
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peesny

新虫 (小有名气)

[求助] 多重PCR加引物的问题 已有4人参与

我做的多重PCR是六重和七重的
要加的引物种类太多，配体系时一个个加太费时
打算配成混合引物溶液的pool
不知道pool可以保存多久呢，把那么多对引物混合在一起会不会对保存时间有影响啊？
还有就是引物终浓度是指某个引物上下游的引物量加起来之后的浓度是吧？
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1楼 2014-08-21 16:01:44
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看海的snoopy

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

6-7对引物可以配成混合液，建议把上下游引物配成引物对，再把各引物对mix一下配成引物混合液。PCR的时候只加一枪就OK。另外引物混合液和普通引物的保存是一样的。
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6楼2020-01-06 10:24:02
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wxiao1990

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
peesny: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-08-21 21:09:30
gyesang: 金币+2, 鼓励交流！ 2014-08-21 23:48:59
一般来说，单个引物溶解后保存在-20℃，一年肯定没问题。如果引物混合起来保存，它是不会发生反应的，保存期应该和单个引物一样，也在一年以上，但具体期限到几年就不清楚了。
      引物终浓度说的应该是单个引物加入到整个PCR体系当中的浓度。
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2楼2014-08-21 21:00:53
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
peesny: 金币+3 2014-08-22 10:50:42
预混合不影响质量，PCR引物浓度指单条引物的终浓度。
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3楼2014-08-22 08:44:35
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爱上鱼……

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
peesny: 金币+3 2014-08-22 10:50:48
没事，我就把引物混一起，然后往体系里面加，没出现啥问题。
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懒病又犯了……
4楼2014-08-22 09:32:02
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