| 查看: 1806 | 回复: 10 | ||
| 当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖 | ||
[求助]
细胞培养问题 已有5人参与
|
||
|
最近在养大肠癌细胞Lovo。出现个问题很是困扰我——细胞总是抱团粘连（一般5-15个一团）。 刚传代接种时就这样，抱团细胞在2/3以上。以后随着培养时间的进展，抱团细胞会长成稠密的一片，看不到细胞轮廓，模糊的一片，上面还有分散的单个圆的细胞，就像一个大烧饼上撒着一些芝麻。。。细胞有层叠，这样势必会使很多底层的细胞摄取营养不良，所以培养基虽然消耗的很快，细胞长的也快（因为太稠密不只一层），但总是有不少的漂浮细胞。最主要的是我下一步要做转染，这样的生长状态我是没法看转染效率的，连细胞轮廓都没有，最后都是一坨一坨的，郁闷！ 培养情况：10%胎牛血清的DMEM培养基，25cm^2培养瓶。消化时间2分钟，终止消化后离心600rpm 5min。 分析可能的原因：1、消化时间短；2、一开始接种密度就偏大，细胞过密，加上传代晚，细胞生长过度；3、血清比例高；4、消化后吹打不均匀 以上原因，1和4都针对地试过相应的操作，没什么效果，可排除。3还未试。自己感觉像第二个，但一次生长过度怎么会使细胞以后一直互相粘连？？ 本人能想到的就这些了，问题尚未解决，还望高人指点啊~  IMG_20140810_122052.jpg  IMG_20140810_122115.jpg |
回复此楼» 猜你喜欢
一志愿武汉理工，总分321，英一数二，求老师收留。
已经有5人回复
-
324求调剂
已经有8人回复
-
284求调剂
已经有12人回复
-
348求调剂
已经有3人回复
-
329求调剂
已经有7人回复
-
求调剂，一志愿 南京航空航天大学大学 ，080500材料科学与工程学硕
已经有4人回复
-
考研调剂
已经有9人回复
-
304材料求调剂
已经有4人回复
-
一志愿郑大085600，310分求调剂
已经有3人回复
-
317求调剂
已经有7人回复
» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
- caco-2细胞的培养
已经有3人回复
- 肝细胞培养问题！
已经有19人回复
- 细胞培养过程中培养液变黄
已经有22人回复
- 细胞培养箱问题
已经有5人回复
- High-five 细胞培养问题
已经有7人回复
- 请教 MDA-MCB-231人乳腺癌细胞培养的一些问题
已经有7人回复
- H9c2细胞培养问题
已经有4人回复
- 293A细胞培养出了问题
已经有10人回复
- 求教昆虫细胞培养问题
已经有7人回复
- MRC-5细胞培养问题
已经有13人回复
- 癌细胞培养问题
已经有17人回复
- 细胞培养板的问题，大家讨论一下！
已经有4人回复
- 关于动物细胞体外培养的问题
已经有4人回复
- HepG2传代培养问题
已经有7人回复
- PC12细胞 培养的问题
已经有9人回复
- 关于THP-1细胞的培养，分化问题
已经有12人回复
- 请教细胞培养瓶清洗问题
已经有4人回复
- 细胞培养总是发现有不少漂浮物
已经有32人回复
- 关于MCF-7细胞培养的问题
已经有12人回复
- 细胞培养相关问题 急！！！！！
已经有13人回复
- 【求助/交流】细胞培养中漂浮物问题
已经有10人回复
- 【求助/交流】求助杂交瘤细胞培养的问题
已经有3人回复
- 【求助/交流】新手上路，大家来助！！！关于细胞培养中换液的两个问题！
已经有19人回复
- 【求助/交流】关于细胞培养皿容积的问题~!
已经有9人回复
8楼2014-08-21 17:48:24
ssssllllnnnn 
至尊木虫 (知名作家)
Translator and Proofreader
- 应助: 452 (硕士)
- 金币: 31580.9
- 红花: 100
- 帖子: 7681
- 在线: 19966.6小时
- 虫号: 3328089
- 注册: 2014-07-17
- 专业: 肿瘤发生
2楼2014-08-12 00:01:36
jurkat.1640
至尊木虫 (文坛精英)
- BioEPI: 2
- 应助: 908 (博后)
- 金币: 17175
- 散金: 1654
- 红花: 121
- 沙发: 41
- 帖子: 14525
- 在线: 2184.8小时
- 虫号: 514340
- 注册: 2008-02-28
- 性别: GG
- 专业: 病毒学
3楼2014-08-12 14:36:59
siyecao1121
铜虫 (小有名气)
- 应助: 1 (幼儿园)
- 金币: 120.1
- 红花: 1
- 帖子: 54
- 在线: 15.2小时
- 虫号: 3270902
- 注册: 2014-06-12
- 性别: MM
- 专业: 膜生物化学与膜生物物理学
【答案】应助回帖
★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
hakkie: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-12-07 22:11:54
感谢参与，应助指数 +1
hakkie: 金币+5, ★★★★★最佳答案 2014-12-07 22:11:54
|
正如楼上所言，有的细胞就是这样喜欢扎堆，可以请教实验室养过这种细胞的师姐师兄~ 我没养过这种细胞，单就我之前养细胞的经验看，我感觉是消化时间可能长了，消化的可能有点过呢，细胞消化不充分的话，不容易吹起来，你在传代的时候是否发现这种现象？细胞消化过了的话，首先细胞特别容易吹起来，而且会出现成团现象（你可以在终止消化的时候镜检观察是否有大量成团细胞），其次，消化过了的话有些细胞膜被损坏了，细胞慢慢就死亡了，所以在后续的培养的时候培养基中漂浮的细胞相对多些~另外，细胞成团也有可能是你传代的时候没有将细胞吹匀的原因~ 楼主说的单个圆的细胞，可能是消化后状态不好不能正常贴壁的细胞，也有可能是成堆的细胞刚刚分裂但是还没来得及贴壁的细胞~ |
4楼2014-08-12 16:09:32
