24小时热门版块排行榜    

查看: 10270  |  回复: 22

我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养过程中培养液变黄 已有11人参与

跟别人要的海拉细胞(DMEM培养的),传代两次后就挂了。期间,拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液(都是1640高糖)一天内就变黄,一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养,更换两次培养液后培养液浑浊了,显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因?????
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

为爱而生
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

tinytan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+4, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:25
1.有无染细真菌?2.细胞传代次数过多?3.培养箱校准?4.操作过于粗放?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-12-24 12:37:28
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

刘璐19890614

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, 有帮助 2013-12-27 16:25:49
是不是细胞本身有问题?不是很懂,来长知识的
加油
2楼2013-12-24 09:07:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:06
建议测试一下培养箱的CO2的浓度,后面变浑浊应该是细胞碎片吧,如果是染菌就没的说了。细胞在无污染条件下坏死,建议从理化性质去考虑,比如温度和CO2浓度是否要校正
ForDream!
3楼2013-12-24 12:31:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

小米鲊

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+10, 处女贴,欢迎常来交流 2013-12-24 18:03:56
我听五月天: 金币+1, 有帮助 2013-12-25 14:03:20
细胞凋亡,但是培养液却快速变黄,先考虑下有没有污染吧。除却污染,是从别人在养的细胞分来的,还是别人冻存的?对方的冻存细胞的温度是?是否在冻存过程中有污染?
5楼2013-12-24 15:28:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gxc0824

银虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
你的血清灭活了吗?
6楼2013-12-25 01:21:05
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

a6379137

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, ★★★很有帮助 2013-12-25 14:02:56
1640缓冲能力是不好,我用1640养hela时,传代后三四个小时就变黄了。但依然是两天传一次,细胞长得还可以。培养液浑浊,可能是死细胞太多,也可能是被污染了。另外,没明白你说的像烧过的纸一样是怎么回事,我怎么感觉我的hela长满了是这样的。。。
7楼2013-12-25 13:02:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
4楼: Originally posted by tinytan at 2013-12-24 12:37:28
1.有无染细真菌?2.细胞传代次数过多?3.培养箱校准?4.操作过于粗放?

Hela细胞是癌细胞不是能无限传代吗?操作时图方便,有时让别人做实验就让他给换液。我知道传代会影响细胞,正常细胞L-929,因为养成后暂时不用就消化过两次,每次大部分冻存,小部分继续培养,这样大概隔天甚至每天就要传代,是不是这样细胞很容易出问题啊?长满了就应该传成很多瓶?浑浊之前,当天晚上我觉得该传代(95%以上吧)但是懒没有做,只是换了液,第二天发现浑浊了,这样很不好吗?
为爱而生
8楼2013-12-25 14:00:54
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by gxc0824 at 2013-12-25 01:21:05
你的血清灭活了吗?

用的胎牛血清,不用灭活,不用过滤
为爱而生
9楼2013-12-25 14:01:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

我听五月天

木虫 (正式写手)

引用回帖:
3楼: Originally posted by western虫 at 2013-12-24 12:31:37
建议测试一下培养箱的CO2的浓度,后面变浑浊应该是细胞碎片吧,如果是染菌就没的说了。细胞在无污染条件下坏死,建议从理化性质去考虑,比如温度和CO2浓度是否要校正

培养箱会自动控制温度37和CO2浓度5%,有显示读数啊。我见它每几秒钟就注射一下CO2。
为爱而生
10楼2013-12-25 14:06:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 我听五月天 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 估计是周四 +3 archvillain 2026-08-18 3/150 2026-08-21 01:48 by jnhyjjm
[基金申请] 科研孤儿太难了 +14 我4大白菜 2026-08-20 15/750 2026-08-20 22:33 by 袁向阳007
[基金申请] 让我中一个面上吧! +8 大萍1987 2026-08-20 10/500 2026-08-20 21:48 by 大萍1987
[基金申请] 言之凿凿,明天官网会通知放榜? +15 医学老男孩 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:35 by CaoLG
[基金申请] 时间戳又变了 +12 wuchongjun 2026-08-20 17/850 2026-08-20 20:05 by spzhao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+3 snowwithsea 2026-08-19 12/600 2026-08-20 15:56 by lfy8008
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +14 kkkl_v 2026-08-19 15/750 2026-08-20 08:21 by sunzitan
[基金申请] filecode,4个jtjc了 +11 ziyangfang 2026-08-19 13/650 2026-08-19 21:28 by aasahr
[教师之家] 为什么余额宝的年化利率越来越低?主要原因有哪些? +5 瞬息宇宙 2026-08-15 5/250 2026-08-19 20:23 by super2002521
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +4 yuleib84 2026-08-19 5/250 2026-08-19 19:52 by hhs666
[基金申请] 今天放榜吗? +14 布布和一二 2026-08-19 15/750 2026-08-19 18:07 by gltch
[基金申请] 快农历七夕节了,轻松一下,男人悄悄话,女施主请不要进来。 +6 Tide man 2026-08-14 7/350 2026-08-19 09:56 by ZJTJZ
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[论文投稿] 投稿咨询 +4 wwm09 2026-08-17 6/300 2026-08-18 15:36 by wwm09
[基金申请] 时间戳又变了8-15 +14 archvillain 2026-08-15 26/1300 2026-08-18 13:37 by phantomgost
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +4 且听虎啸 2026-08-17 5/250 2026-08-18 00:49 by 蔡棒棒菂
[基金申请] 感觉是下周放榜了 +6 angus9576 2026-08-17 11/550 2026-08-17 23:57 by angus9576
[基金申请] 各位道友,我要去昆明玩几天,回来见。 +7 Tide man 2026-08-14 8/400 2026-08-15 01:11 by arzu_hma
信息提示
请填处理意见