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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 细胞科学 » 细胞培养过程中培养液变黄
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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养过程中培养液变黄 已有11人参与

跟别人要的海拉细胞（DMEM培养的），传代两次后就挂了。期间，拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液（都是1640高糖）一天内就变黄，一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养，更换两次培养液后培养液浑浊了，显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因？？？？？
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为爱而生
1楼 2013-12-23 15:59:48
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我听五月天

木虫 (正式写手)
引用回帖:
4楼: Originally posted by tinytan at 2013-12-24 12:37:28
1.有无染细真菌？2.细胞传代次数过多？3.培养箱校准？4.操作过于粗放？

Hela细胞是癌细胞不是能无限传代吗？操作时图方便，有时让别人做实验就让他给换液。我知道传代会影响细胞，正常细胞L-929，因为养成后暂时不用就消化过两次，每次大部分冻存，小部分继续培养，这样大概隔天甚至每天就要传代，是不是这样细胞很容易出问题啊？长满了就应该传成很多瓶？浑浊之前，当天晚上我觉得该传代（95%以上吧）但是懒没有做，只是换了液，第二天发现浑浊了，这样很不好吗？
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为爱而生
8楼2013-12-25 14:00:54
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刘璐19890614

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, ★有帮助 2013-12-27 16:25:49
是不是细胞本身有问题？不是很懂，来长知识的
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加油
2楼2013-12-24 09:07:30
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:06
建议测试一下培养箱的CO2的浓度，后面变浑浊应该是细胞碎片吧，如果是染菌就没的说了。细胞在无污染条件下坏死，建议从理化性质去考虑，比如温度和CO2浓度是否要校正
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ForDream！
3楼2013-12-24 12:31:37
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tinytan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
silicare: 金币+4, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:25
1.有无染细真菌？2.细胞传代次数过多？3.培养箱校准？4.操作过于粗放？

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2013-12-24 12:37:28
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