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我听五月天

木虫 (正式写手)

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[求助] 细胞培养过程中培养液变黄已有11人参与

跟别人要的海拉细胞（DMEM培养的），传代两次后就挂了。期间，拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液（都是1640高糖）一天内就变黄，一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养，更换两次培养液后培养液浑浊了，显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因？？？？？

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为爱而生

1楼 2013-12-23 15:59:48

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引用回帖:

4楼: Originally posted by tinytan at 2013-12-24 12:37:28
1.有无染细真菌？2.细胞传代次数过多？3.培养箱校准？4.操作过于粗放？

Hela细胞是癌细胞不是能无限传代吗？操作时图方便，有时让别人做实验就让他给换液。我知道传代会影响细胞，正常细胞L-929，因为养成后暂时不用就消化过两次，每次大部分冻存，小部分继续培养，这样大概隔天甚至每天就要传代，是不是这样细胞很容易出问题啊？长满了就应该传成很多瓶？浑浊之前，当天晚上我觉得该传代（95%以上吧）但是懒没有做，只是换了液，第二天发现浑浊了，这样很不好吗？