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我听五月天

木虫 (正式写手)

[求助] 细胞培养过程中培养液变黄 已有11人参与

跟别人要的海拉细胞(DMEM培养的),传代两次后就挂了。期间,拿到细胞第二天就看到细胞轮廓开始变得不清晰、不透亮。之后细胞培养液(都是1640高糖)一天内就变黄,一天早晚换两次。后来轮廓更不清晰、细胞更不透亮。就改用DMEM培养,更换两次培养液后培养液浑浊了,显微镜下的细胞看上去都好像烧过的纸一样。就丢弃了。请教大神们这是什么原因?????
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为爱而生
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western虫

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+2, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:06
建议测试一下培养箱的CO2的浓度,后面变浑浊应该是细胞碎片吧,如果是染菌就没的说了。细胞在无污染条件下坏死,建议从理化性质去考虑,比如温度和CO2浓度是否要校正
ForDream!
3楼2013-12-24 12:31:37
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刘璐19890614

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
我听五月天: 金币+2, ★有帮助 2013-12-27 16:25:49
是不是细胞本身有问题?不是很懂,来长知识的
加油
2楼2013-12-24 09:07:30
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tinytan

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+4, 谢谢参与 2013-12-24 18:03:25
1.有无染细真菌?2.细胞传代次数过多?3.培养箱校准?4.操作过于粗放?

[ 发自小木虫客户端 ]
4楼2013-12-24 12:37:28
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小米鲊

铁虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
silicare: 金币+10, 处女贴,欢迎常来交流 2013-12-24 18:03:56
我听五月天: 金币+1, ★有帮助 2013-12-25 14:03:20
细胞凋亡,但是培养液却快速变黄,先考虑下有没有污染吧。除却污染,是从别人在养的细胞分来的,还是别人冻存的?对方的冻存细胞的温度是?是否在冻存过程中有污染?
5楼2013-12-24 15:28:22
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