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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 化学化工区 » 环境 » 交流探讨 » 高效液相样品出不来峰是怎么回事？
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求知者001

荣誉版主 (知名作家)

全球通，能否？！

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[求助] 高效液相样品出不来峰是怎么回事？ 已有10人参与

我测的是水样中的抗生素，用高效液相+紫外检测器。流动相为A乙腈，B0.01M草酸。
图中依次为（上）标样，（中）300mL水样浓缩600倍，（下）500mL水样浓缩1000倍的高效液相色谱图，600倍与1000倍都没有出峰，且图形相近，请问我这是什么问题？是没有洗脱下来？还是淋洗的时候把样品淋洗掉了？可是我看文献还有用5%的甲醇淋洗，甚至还有用纯甲醇淋洗的呀...
PS：我的前处理是固相萃取，用的Waters Oasis小柱。按照文献的方法，用5ml甲醇、5ml水（pH=4）活化。进样后，先用2mL2%甲醇淋洗，抽真空干燥5分钟左右，再用2×5ml甲醇洗脱。

高效液相样品出不来峰是怎么回事？
标样+600倍+1000倍.JPG
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人生最曼妙的风景，是内心的淡定与从容。
1楼 2014-08-08 20:10:00
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任长存

禁虫 (正式写手)

Environment Protecting

【答案】应助回帖

★
gaofeng925: 金币+1, 积极讨论 2014-08-10 12:55:02
就因为纵坐标很小才认为是基线漂移，我以前做液相就是有干扰物质也是会出峰的，就是百分比会减小而已，
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7楼2014-08-08 22:49:32
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任长存

禁虫 (正式写手)

Environment Protecting

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
求知者001: 金币+15, ★★★很有帮助, 3Q 2014-08-08 22:48:52
stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2014-08-12 08:54:03
后两个基本属于基线漂移了吧，目测是你测的样品中抗生素浓度太少。减少稀释倍数  试试看
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2楼2014-08-08 20:16:12
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liwentao2010

荣誉版主 (文坛精英)

山涛

优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
求知者001: 金币+15, ★★★很有帮助, 3Q 2014-08-08 22:49:03
stormxuhao: 金币+1, 积极回复 2014-08-12 08:54:12
浓度低或者有干扰物质，前者可以借用UPLC测定
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加油！
3楼2014-08-08 21:24:13
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求知者001

荣誉版主 (知名作家)

全球通，能否？！

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引用回帖:
2楼: Originally posted by 任长存 at 2014-08-08 20:16:12
后两个基本属于基线漂移了吧，目测是你测的样品中抗生素浓度太少。减少稀释倍数  试试看

你看一下样品的两个图，纵坐标很小。我是浓缩的样品，浓缩了1000倍仍不见有峰出现，之前看文献，通常浓缩500-1000倍就能够测的出啊，为什么我这个一点峰都木有
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人生最曼妙的风景，是内心的淡定与从容。
4楼2014-08-08 22:05:40
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