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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 总RNA电泳图求分析
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吴宫花草

木虫 (正式写手)

[求助] 总RNA电泳图求分析 已有2人参与

下图为用TRNzol法提取RNA后跑的电泳图，胶浓度为1.5%，maker为DL2000，求分析
http://image.keyan.cc/data/bcs/2 ... _1407249285_318.jpg

总RNA电泳图求分析
1.jpg
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1楼 2014-08-05 22:38:15
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ssssllllnnnn

至尊木虫 (知名作家)

Translator and Proofreader

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
吴宫花草(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-08-06 09:28:58
吴宫花草: 金币+8, ★★★★★最佳答案, 感谢 2014-08-06 10:03:13
1、有些样品中有DNA污染。
2、可以看到28S和18S条带，但二者比例不好，提示有降解。
3、最前面的也许是5S，但更可能是降解产物的结果？

如果你所提的RNA是为了RT-PCR或QPCR，应该可用，如果其他目的，则需要再改善。
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2楼2014-08-05 22:52:57
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咸鱼~翻身

新虫 (初入文坛)
降解得严重。
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3楼2014-08-06 08:08:16
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songzuowei

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
顶楼上 存在部分降解 但不影响使用
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4楼2014-08-06 08:44:20
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连指手套

新虫 (初入文坛)
同意楼上的意见。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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5楼2014-08-07 15:40:58
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
1.拖带降解严重，如果是仅仅做RT-PCR可用
2.若果还要做QPCR就不要用了，这样数据不太可靠。
3.部分样品点胶孔很亮，应该是DNA污染，建议重提或者使用DNASE。
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吴宫花草
生命不息奋斗不止
6楼2014-08-08 17:52:20
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吴宫花草

木虫 (正式写手)
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by 冷雁孤旅 at 2014-08-08 17:52:20
1.拖带降解严重，如果是仅仅做RT-PCR可用
2.若果还要做QPCR就不要用了，这样数据不太可靠。
3.部分样品点胶孔很亮，应该是DNA污染，建议重提或者使用DNASE。

谢谢指教，我后面拿这些样做了反转录，然后做了个普通PCR，用actin来P的，能出条带总RNA电泳图求分析-1，（每块胶最后一个淡淡条带的为阴性对照），你看这个结果能做QPCR么？先谢谢
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7楼2014-08-10 15:28:23
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冷雁孤旅

木虫 (著名写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 吴宫花草 at 2014-08-10 15:28:23
谢谢指教，我后面拿这些样做了反转录，然后做了个普通PCR，用actin来P的，能出条带，（每块胶最后一个淡淡条带的为阴性对照），你看这个结果能做QPCR么？先谢谢...

做了RT-PCR肯定能做出来 但是有一下几个问题 1. 你有基因组DNA污染 如果是原核生物 你去上荧光的时候 会出现DNA污染的杂峰 2.上面说了 你的降解有点严重 如果  直接上荧光得到的数据是不可信的 如果你要发文章 别人看了你的这个图片 肯定会质疑你的结果的准确性
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生命不息奋斗不止
8楼2014-08-10 15:53:37
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