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edward_cen

新虫 (初入文坛)

[求助] 凝胶电泳中的问题 已有1人参与

我的实验对象是原生动物中纤毛虫单个虫体的18s、ITS、LSU以及不同海水深度滤膜下纤毛虫的18s。
使用Qiagen-DNAextraction并进行PCR。
跑胶后出现图示情况:Mark(1kb)跑出很好的胶,但其他都没跑出来,并且点样孔亮,应该是没跑出来。
一个怀疑是杂质太多,PCR出了问题。
还请问这里的大牛给我解答一下,并应如何找到错误和改进呢?
非常感谢!

凝胶电泳中的问题
电泳图1


凝胶电泳中的问题-1
电泳图2
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1203227264

新虫 (小有名气)

请问你的纤毛虫18s的序列可以借鉴一下吗?

发自小木虫Android客户端
4楼2018-04-26 21:10:28
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物理庸者

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
应该是PCR没有P出来吧!MARKER能跑出来说明 除了你的样品之外,其它没有说明问题。可能问题出在样品吧。  下面模糊的条带应该是引物吧,形成的二聚体,或者干脆就是引物。
2楼2014-07-27 08:39:50
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edward_cen

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 物理庸者 at 2014-07-27 08:39:50
应该是PCR没有P出来吧!MARKER能跑出来说明 除了你的样品之外,其它没有说明问题。可能问题出在样品吧。  下面模糊的条带应该是引物吧,形成的二聚体,或者干脆就是引物。

恩。谢谢。今天打算再p一次。
to be best!
3楼2014-07-27 09:54:49
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wuyiping

新虫 (初入文坛)

兄弟,你的电泳图把我看懵了,第二张图怎么胶的上下都有孔啊。对比条带的话,你应该放倒了。而且第二张图上下孔都亮了,你跑的时间肯定太久。    marker跑得也有问题,分析问题之前先跑出一张漂亮干净的图吧

发自小木虫Android客户端
5楼2018-04-28 00:24:51
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