24小时热门版块排行榜    

北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
查看: 1909  |  回复: 8

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳的几个问题,急求!!! 已有5人参与

本来刚刚接触分子生物的相关实验,最近老板安排跑微卫星引物的通用性,从相关文献上获得了凝胶的配方及电泳步骤,但是做起实验来却遇到了像许多困难,急求大神帮忙!
1.凝胶后往加样孔加样经常出现扩散现象,本人尝试过3次不同的pcr产物结果都是如此,凝胶时间为70分钟,问题是不是出在缓冲液上?
2.起胶的时候出现断裂现象,胶很脆。
以上两种现象会不会与配置TBE时的EDTA质量有关,EDTA溶液是去年配制的,经询问说是可以使用。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Titanic416

银虫 (知名作家)

北京方便面真方便

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
蜡笔晓寒(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-27 09:27:05
这个还没有遇到过呢,ssr时,出现胶脱落的现象,后来发现是染色的时候,在氢氧化钠中泡久了,后来就没出现过,你预电泳了没有,点样太慢了吗,缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了,肯定是配的有问题。这个你在好好查查,摸清条件是关键呀。修复

[ 发自小木虫客户端 ]
阳光总在风雨后,请相信有彩虹!
2楼2014-07-27 00:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
2楼: Originally posted by Titanic416 at 2014-07-27 00:12:43
这个还没有遇到过呢,ssr时,出现胶脱落的现象,后来发现是染色的时候,在氢氧化钠中泡久了,后来就没出现过,你预电泳了没有,点样太慢了吗,缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了,肯定是配的有问题。这个 ...

恩  今天我再试一下 我把TBE重新配了
3楼2014-07-27 08:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幺哥撸啊撸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
蜡笔晓寒(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-27 09:34:30
你的MARKER清楚么,不清楚就是胶版没做好。清楚的话就是模板或TAG酶不行,用新的试试吧
4楼2014-07-27 08:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-28 08:43:14
电泳液出了问题可能是你那种情况,温度也是一个影响因素,很多了,能具体叙述的问题吗?
5楼2014-07-27 20:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
4楼: Originally posted by 幺哥撸啊撸 at 2014-07-27 08:55:39
你的MARKER清楚么,不清楚就是胶版没做好。清楚的话就是模板或TAG酶不行,用新的试试吧

已找到原因  谢谢
6楼2014-07-28 14:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
5楼: Originally posted by forrestgump at 2014-07-27 20:12:50
电泳液出了问题可能是你那种情况,温度也是一个影响因素,很多了,能具体叙述的问题吗?

已找到原因,我的TBE出了问题,你说的温度我也遇到过不过现在已经解决了 ,谢谢
7楼2014-07-28 15:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华胥调

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
有可能是TEMED加多了。

[ 发自小木虫客户端 ]
8楼2014-07-28 16:11:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ranen516

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-08-21 16:03:48
我们用这个胶跑蛋白!胶脆的应该是配的问题!我们10%、8%的是挺有弹性的!
9楼2014-07-29 11:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜡笔晓寒 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 一志愿河北工业大学材料工程,初试344求专硕调剂 +3 15933906766 2026-04-05 3/150 2026-04-05 22:17 by dongzh2009
[考研] 求调剂 +14 111623 2026-04-04 16/800 2026-04-05 22:09 by 醉翁wl
[考研] 285求调剂 +5 AZMK 2026-04-04 7/350 2026-04-05 17:16 by yulian1987
[考研] 270求调剂 +9 小杰pp 2026-03-31 11/550 2026-04-05 11:02 by 风雨无晴
[考研] 材料化工306分找合适调剂 +14 沧海轻舟e 2026-04-04 14/700 2026-04-05 09:53 by 朱云虎202
[考研] 考研求调剂 +3 木心想继续深造 2026-04-03 3/150 2026-04-03 21:56 by 啵啵啵0119
[考研] 288求调剂 一志愿哈工大 材料与化工 +39 洛神哥哥 2026-03-31 41/2050 2026-04-03 21:51 by qlm5820
[考研] 292求调剂 +21 是妍子也是研子 2026-03-30 22/1100 2026-04-03 21:44 by qlm5820
[考研] 一志愿华中农业071010,总分320求调剂 +7 困困困困坤坤 2026-04-02 7/350 2026-04-03 17:26 by Yuena_Wang
[考研] 338求调剂 +7 晟功? 2026-04-03 7/350 2026-04-03 16:46 by wxiongid
[考研] 生物学硕341求调剂 +4 你笑起来像云朵 2026-04-03 4/200 2026-04-03 10:32 by macy2011
[考研] 环境工程297分求调剂一志愿杭高院 +15 GENJIOW 2026-03-31 16/800 2026-04-02 17:56 by cyh—315
[考研] 求调剂 302分初试 0854 +5 伶可乐 2026-04-02 5/250 2026-04-02 17:53 by 笔落锦州
[考研] 271求调剂 +15 勒布朗@ 2026-03-31 20/1000 2026-04-02 11:24 by Sammy2
[考研] 0805求调剂 +8 是水分 2026-03-31 8/400 2026-04-02 10:46 by guanxin1001
[考研] 372求调剂 +3 jj涌77 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:57 by olim
[考研] 土木304求调剂 +6 兔突突突, 2026-03-31 7/350 2026-04-02 09:06 by coolminer
[考研] 279求调剂 +7 莫xiao 2026-04-01 7/350 2026-04-01 22:05 by 客尔美德
[考研] 0710生物学求调剂! +6 叙述文 2026-03-31 6/300 2026-04-01 09:39 by JourneyLucky
[考研] 福建理工大学材料学院先进合金团队招收考研调剂学生 +3 大华金商都 2026-03-30 4/200 2026-03-31 01:04 by 方英俊602
信息提示
请填处理意见