应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 聚丙烯酰胺凝胶电泳的几个问题，急求！！！
91/1返回列表
查看: 1858  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)

[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳的几个问题，急求！！！ 已有5人参与

本来刚刚接触分子生物的相关实验，最近老板安排跑微卫星引物的通用性，从相关文献上获得了凝胶的配方及电泳步骤，但是做起实验来却遇到了像许多困难，急求大神帮忙！
1.凝胶后往加样孔加样经常出现扩散现象,本人尝试过3次不同的pcr产物结果都是如此，凝胶时间为70分钟，问题是不是出在缓冲液上?
2.起胶的时候出现断裂现象，胶很脆。
以上两种现象会不会与配置TBE时的EDTA质量有关，EDTA溶液是去年配制的，经询问说是可以使用。
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

核酸生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关商家推荐: (我也要在这里推广)

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-26 23:46:23
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Titanic416

银虫 (知名作家)

北京方便面真方便

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
蜡笔晓寒(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-27 09:27:05
这个还没有遇到过呢，ssr时，出现胶脱落的现象，后来发现是染色的时候，在氢氧化钠中泡久了，后来就没出现过，你预电泳了没有，点样太慢了吗，缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了，肯定是配的有问题。这个你在好好查查，摸清条件是关键呀。修复

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下(1人) 回复此楼
阳光总在风雨后，请相信有彩虹！
2楼2014-07-27 00:12:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
2楼: Originally posted by Titanic416 at 2014-07-27 00:12:43
这个还没有遇到过呢，ssr时，出现胶脱落的现象，后来发现是染色的时候，在氢氧化钠中泡久了，后来就没出现过，你预电泳了没有，点样太慢了吗，缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了，肯定是配的有问题。这个 ...

恩  今天我再试一下 我把TBE重新配了
赞一下 回复此楼
3楼2014-07-27 08:52:07
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

幺哥撸啊撸

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
蜡笔晓寒(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-07-27 09:34:30
你的MARKER清楚么，不清楚就是胶版没做好。清楚的话就是模板或TAG酶不行，用新的试试吧
赞一下 回复此楼
4楼2014-07-27 08:55:39
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

forrestgump

新虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+2, 鼓励交流 2014-07-28 08:43:14
电泳液出了问题可能是你那种情况，温度也是一个影响因素，很多了，能具体叙述的问题吗？
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-27 20:12:50
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
4楼: Originally posted by 幺哥撸啊撸 at 2014-07-27 08:55:39
你的MARKER清楚么，不清楚就是胶版没做好。清楚的话就是模板或TAG酶不行，用新的试试吧

已找到原因  谢谢
回复此楼
6楼2014-07-28 14:59:53
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

蜡笔晓寒

新虫 (初入文坛)
引用回帖:
5楼: Originally posted by forrestgump at 2014-07-27 20:12:50
电泳液出了问题可能是你那种情况，温度也是一个影响因素，很多了，能具体叙述的问题吗？

已找到原因，我的TBE出了问题，你说的温度我也遇到过不过现在已经解决了 ，谢谢
赞一下 回复此楼
7楼2014-07-28 15:00:55
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

华胥调

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
有可能是TEMED加多了。

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
8楼2014-07-28 16:11:02
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Ranen516

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-08-21 16:03:48
我们用这个胶跑蛋白！胶脆的应该是配的问题！我们10%、8%的是挺有弹性的！
赞一下 回复此楼
9楼2014-07-29 11:00:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 蜡笔晓寒 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 化学调剂0703 +7 啊我我的 2026-03-11 7/350 2026-03-15 23:03 by 凌千颂111
[考研] 梁成伟老师课题组欢迎你的加入 +6 一鸭鸭哟 2026-03-14 7/350 2026-03-15 22:12 by Winj1e
[考博] 欢迎申博同学联系 +3 天道酬勤2026686 2026-03-10 7/350 2026-03-15 19:03 by 天道酬勤2026686
[考研] 311求调剂 +5 冬十三 2026-03-15 5/250 2026-03-15 18:38 by 无际的草原
[考研] 294求调剂 +3 Zys010410@ 2026-03-13 4/200 2026-03-15 10:59 by zhq0425
[考研] 085600材料与化工 求调剂 +11 enenenhui 2026-03-13 12/600 2026-03-14 21:48 by laoshidan
[考研] 080500，材料学硕302分求调剂学校 +4 初识可乐 2026-03-14 5/250 2026-03-14 21:08 by peike
[考研] 本科南京大学一志愿川大药学327 +3 麦田耕者 2026-03-14 3/150 2026-03-14 20:04 by 外星文明
[考研] 289求调剂 +4 这么名字咋样 2026-03-14 6/300 2026-03-14 18:58 by userper
[考研] 学硕285求调剂 +13 Wisjxn 2026-03-12 46/2300 2026-03-14 10:33 by JourneyLucky
[考研] 313分生物学求调剂 +6 Yyt杨1 2026-03-09 8/400 2026-03-14 03:00 by JourneyLucky
[考研] 321求调剂 +3 CUcat 2026-03-10 3/150 2026-03-14 00:25 by JourneyLucky
[考研] 复试调剂 +9 Copy267 2026-03-10 9/450 2026-03-13 23:45 by userper
[考研] 279求调剂 +3 Dizzy123@ 2026-03-10 3/150 2026-03-13 23:02 by JourneyLucky
[考研] 材料专硕288分求调剂 一志愿211 +4 在家想你 2026-03-11 4/200 2026-03-13 22:49 by JourneyLucky
[考研] 337一志愿华南理工0805材料求调剂 +7 mysdl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 22:43 by JourneyLucky
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 工科材料085601 279求调剂 +8 困于星晨 2026-03-12 10/500 2026-03-13 15:42 by ms629
[考研] 材料301分求调剂 +5 Liyouyumairs 2026-03-12 5/250 2026-03-13 14:42 by JourneyLucky
[考研] 283求调剂，材料、化工皆可 +8 苏打水7777 2026-03-11 10/500 2026-03-13 09:06 by Linda Hu
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭