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蜡笔晓寒

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[求助] 聚丙烯酰胺凝胶电泳的几个问题，急求！！！已有5人参与

本来刚刚接触分子生物的相关实验，最近老板安排跑微卫星引物的通用性，从相关文献上获得了凝胶的配方及电泳步骤，但是做起实验来却遇到了像许多困难，急求大神帮忙！
1.凝胶后往加样孔加样经常出现扩散现象,本人尝试过3次不同的pcr产物结果都是如此，凝胶时间为70分钟，问题是不是出在缓冲液上?
2.起胶的时候出现断裂现象，胶很脆。
以上两种现象会不会与配置TBE时的EDTA质量有关，EDTA溶液是去年配制的，经询问说是可以使用。

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1楼 2014-07-26 23:46:23

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Titanic416

银虫 (知名作家)

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【答案】应助回帖

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蜡笔晓寒(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-07-27 09:27:05

这个还没有遇到过呢，ssr时，出现胶脱落的现象，后来发现是染色的时候，在氢氧化钠中泡久了，后来就没出现过，你预电泳了没有，点样太慢了吗，缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了，肯定是配的有问题。这个你在好好查查，摸清条件是关键呀。修复

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阳光总在风雨后，请相信有彩虹！

2楼2014-07-27 00:12:43

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蜡笔晓寒

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2楼: Originally posted by Titanic416 at 2014-07-27 00:12:43
这个还没有遇到过呢，ssr时，出现胶脱落的现象，后来发现是染色的时候，在氢氧化钠中泡久了，后来就没出现过，你预电泳了没有，点样太慢了吗，缓冲液换下试试。七十分钟应该够了的。胶断了，肯定是配的有问题。这个 ...

恩今天我再试一下我把TBE重新配了

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3楼2014-07-27 08:52:07

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