24小时热门版块排行榜    

查看: 6081  |  回复: 11

1990xuxiao

银虫 (正式写手)

[求助] 关于酵母同源重组的问题

我想问一下,在酵母同源重组时,选择用>10ug量的含同源臂的PCR片段电转和选择用含同源臂目的片段的线性化质粒电转酵母,同源重组效率更高更好,为什么呢
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
回帖置顶 ( 共有1个 )

luwei13566

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包,谢谢回帖
gyesang: 金币+3, 应助指数+1, 鼓励回帖交流! 2014-07-23 12:54:29
gyesang: 回帖置顶 2014-07-23 12:54:41
直接扩增出来的片段只要含有大小合适的同源臂和筛选标记作用和载体是一样的。但是PCR产物必须得纯化,除去引物二聚体和杂带,而且还得测序保证序列的准确度,纯化后如果你还能得到>10ug的产物那自然没有问题。载体的好处是你不需要考虑同源臂大小和内部的必要元件,直接把你的基因和载体连上再转化就可以了
大家相互帮助哈
8楼2014-07-22 22:53:10
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
普通回帖

1990xuxiao(金币+1): 谢谢参与
祝福

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-07-22 20:25:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1990xuxiao(金币+1): 谢谢参与
3楼2014-07-22 20:28:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1990xuxiao(金币+1): 谢谢参与
4楼2014-07-22 20:31:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1990xuxiao(金币+1): 谢谢参与
祝福
5楼2014-07-22 20:31:25
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1990xuxiao(金币+1): 谢谢参与
6楼2014-07-22 20:32:42
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
7楼2014-07-22 20:33:46
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Neo2000

木虫 (著名写手)

作化学转化就OK啦,效率更高,15bp以上的同源序列就能做

[ 发自小木虫客户端 ]
9楼2014-07-24 21:39:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

1990xuxiao

银虫 (正式写手)

引用回帖:
8楼: Originally posted by luwei13566 at 2014-07-22 22:53:10
直接扩增出来的片段只要含有大小合适的同源臂和筛选标记作用和载体是一样的。但是PCR产物必须得纯化,除去引物二聚体和杂带,而且还得测序保证序列的准确度,纯化后如果你还能得到>10ug的产物那自然没有问题。载 ...

恩,我现在就是用载体线性化后再电转的,希望能有效果
10楼2014-07-26 10:02:12
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 1990xuxiao 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +3 h4CP7TrQR8Lg 2026-08-22 5/250 2026-08-23 12:09 by LR9qGULyN2ew
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 9/450 2026-08-23 10:44 by IXZuIJ2Q7OVy
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 10/500 2026-08-23 07:17 by OEbVnUOu01ol
[硕博家园] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +3 2JOx3r2CYEgw 2026-08-22 7/350 2026-08-23 03:43 by OEbVnUOu01ol
[论文投稿] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QTy3jDtz1uLt 2026-08-21 9/450 2026-08-23 03:04 by OEbVnUOu01ol
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[教师之家] 售一区SCI文章T0P,我:8O.551.O54,科目全,可十急 +4 2JOx3r2CYEgw 2026-08-21 4/200 2026-08-22 16:52 by sunzitan
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 基金啊基金 +4 longfie172 2026-08-20 4/200 2026-08-21 08:58 by mark mao
[基金申请] 今天系统多次维护,明天很可能放榜! +10 zju2000 2026-08-16 11/550 2026-08-20 20:02 by cl479861084
[基金申请] 时间戳变了,能看出什么问题? +18 基诺咪客 2026-08-17 23/1150 2026-08-20 17:19 by Godzela
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 朋友圈看到的 +6 wangzilk 2026-08-18 8/400 2026-08-19 10:55 by Haru815
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见