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包涵体上镍离子柱纯化后,洗脱收集的液体中目的蛋白不见了 已有4人参与
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我的目的蛋白带有his标签,8M尿素溶解包涵体, 纯化时binding buffer:7M Urea,100mM NaH2PO4,100mM Tris ,pH8.0; Washing buffer:8M Urea,100mM NaH2PO4,100mM Tris ,pH6.3; Elution buffer:8M Urea,100mM NaH2PO4,100mM Tris ,pH4.5; 结果洗脱收集的液体中没有目的蛋白,连strip buffer(EDTA)后收集的液体也没有。 怎么回事,纯化之前蛋白电泳检测是存在目的蛋白的,但纯化后竟然没蛋白了。求助各位大神了 |
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蛋白质生物学实验经验 | 蛋白表达纯化与检测 |
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5楼2014-07-14 17:07:41







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