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zq4725106

新虫 (初入文坛)

[求助] 如何根据已知基因组序列拼接未知序列 已有1人参与

各位大虾,最近实验室测了一株菌,测得草图,比对发现与genebank 中的一株菌(complete sequence)的相似度达99%,如何根据这个已知的序列拼接我测的序列?请各位大虾赐教
PS:scaffold 有280个,如果挨个比对的话太耗时
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流! 2014-07-09 16:08:11
DNAstar中的SeqMan软件包也可以用于序列拼接。启动:DNAstar中的SeqMan,选择File--->New,建立一个新文件,在Unassembled Sequences窗口,既然要拼接DNA序列,肯定不止一个文件,把它们都建在在Unassembled Sequences窗口下的大的对话框里,自己对每一个文件七个文件名。然后选择窗口上端的“add Sequence”按键,选择要拼接的各个文件,或者就选Add All键。窗口上有个"Trim Ends",点击打开,拉下菜单,在里面选项里选择一些优化的选项选择严谨度。退出对话框,再点击Unassembled Sequences窗口右边的Options按键,打开Options菜单,显示转配前的全部选择一览表,单击Scan All,可以自行根据对话框内的各种提示调整设定或者使用默认设定,为调整好的话,程序会有提示。设定好之后退出Options菜单,返回Unassembled Sequences窗口界面,点击左上角的Assemble按键,Unassembled Sequences窗口立即消失,报告窗口会显示装配进度。
拼装完毕后,点击Contig---->Alignment View观看信息,在Alignment of  Contig窗口中。
如果输入的序列信息DNAstar无法识别,可以用DNAstar的文件转换功能转换文件格式后再拼接序列。
具体操作可以参考网上的最新版本的DNAstar程序与对应软件说明。
3楼2014-07-09 11:22:56
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凌波丽

专家顾问 (知名作家)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
gyesang: 金币+5, 鼓励回帖交流! 2014-07-09 16:08:20
建议使用:Velvet软件包:http://www.ebi.ac.uk/~zerbino/Velvet,具体操作请见:薛庆中 等 编著,DNA和蛋白质序列数据分析工具,科学出版社,2012年,第三版,325-333,第17章 全基因组序列拼接的流程和方法。

生物信息学参考书:
1.薛庆中 等 编著 ,DNA和蛋白质序列数据分析工具(第二版)PDF
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=6358121&fpage=1&target=blank
下载后即可阅读。
2.薛庆中 等 编著,DNA和蛋白质序列数据分析工具_(第三版)
http://muchong.com/bbs/viewthread.php?tid=7614763&fpage=1&target=blank
下载后好像无法解压,楼主试试看吧,至少“DNA和蛋白质序列数据分析工具(第二版)”肯定能够用。
薛庆中 等 编著,DNA和蛋白质序列数据分析工具,科学出版社,2010年,第二版 和 薛庆中 等 编著,DNA和蛋白质序列数据分析工具,科学出版社,2012年,第三版,都是讲的生物信息学数据库和生物信息学软件的具体应用,很容易看懂并且自己上手操作,不过没有讲述各种算法的原理。
2楼2014-07-09 10:28:10
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zq4725106

新虫 (初入文坛)

引用回帖:
3楼: Originally posted by 凌波丽 at 2014-07-09 11:22:56
DNAstar中的SeqMan软件包也可以用于序列拼接。启动:DNAstar中的SeqMan,选择File--->New,建立一个新文件,在Unassembled Sequences窗口,既然要拼接DNA序列,肯定不止一个文件,把它们都建在在Unassembled Seq ...

非常感谢,终于遇到专家了!!!
4楼2014-08-08 17:34:10
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