应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 请教为什Western Blot一定要用两种抗体？
北京石油化工学院2026年研究生招生接收调剂公告
91/1返回列表
查看: 4698  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Gloria001

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 请教为什Western Blot一定要用两种抗体？ 已有3人参与

通常Western Blot中都使用两种抗体进行显色，为什么不能用一种呢？例如直接用连接了HRP的抗体检测抗原，然后显色呢？
请高手指点！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-07 09:37:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 13:11:43
Gloria001: 金币+1, ★有帮助 2014-07-08 14:07:06
楼主说到的是两种可行的不同方法，前者是印迹，后者是ELISA的原理方法，但其实都涉及两种抗体的，楼主在查一下资料吧
赞一下 回复此楼
兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
2楼2014-07-07 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Gloria001: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-08 14:06:34
你说的是可以的啊，可以直接在一抗上做标记，比如HRP或者AP，但是这样做成本很高，相对而言在二抗上做标记，也就标记那么几种
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-07-07 13:12:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Gloria001: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-08 14:06:46
1.降低成本；2.放大信号，提高检测的灵敏度。
赞一下 回复此楼
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
4楼2014-07-08 11:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

简牧风爱

新虫 (初入文坛)
这个当然是可以的，二抗孵育可放大信号
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-12 19:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pengchenping

铁虫 (初入文坛)
可以啊，只是选择问题啦

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-14 12:42:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragon2013

新虫 (初入文坛)
其他人都说了用两种抗体的作用，放大信号。也可以用一种，在目的蛋白中加上生物素标签，利用链霉素亲和的抗体（Streptavidin-HRP）就可以。但会有以一下问题：1.在用脱脂奶粉时会出现一些背景，因为在脱脂奶粉中会有生物素化的成分。2.会出现非特异条带，在提取蛋白中出目的条带外也会出现其他的生物素化的蛋白。
利用链霉素亲和的抗体，主要用于蛋白分离纯化，因为生物素化的蛋白与Streptavidin的作用较强可以使用更为剧烈的条件，例如可以将SDS达到1%洗脱。现在好多研究蛋白相互作用的都使用这种方法。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-07-22 20:09:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Gloria001

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dragon2013 at 2014-07-22 20:09:58
其他人都说了用两种抗体的作用，放大信号。也可以用一种，在目的蛋白中加上生物素标签，利用链霉素亲和的抗体（Streptavidin-HRP）就可以。但会有以一下问题：1.在用脱脂奶粉时会出现一些背景，因为在脱脂奶粉中会有 ...

谢谢，说明很详细。
回复此楼
8楼2014-07-24 09:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragon2013

新虫 (初入文坛)
为了信号放大
回复此楼
9楼2016-07-19 10:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Gloria001 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 274求调剂求调剂 +6 Jachenbingoo 2026-04-06 7/350 2026-04-06 23:09 by lbsjt
[考研] 285求调剂 +15 哦呦呼o 2026-04-04 17/850 2026-04-06 23:02 by chenzhimin
[考研] 一志愿郑州大学085600求调剂 +19 吃的不少 2026-04-05 22/1100 2026-04-06 22:39 by tianyyysss
[考研] 328求调剂 +3 ghhh88888 2026-04-06 3/150 2026-04-06 21:35 by 啵啵啵0119
[考研] 考研调剂一志愿北矿安全科学与工程学硕316 +3 Wwwwwww哇 2026-04-06 3/150 2026-04-06 20:55 by lbsjt
[考研] 求调剂到材料 +5 程9915 2026-04-06 5/250 2026-04-06 15:21 by yulian1987
[考研] 272分求调剂 +4 wangyile2233 2026-04-02 4/200 2026-04-05 22:21 by 286640313
[考研] 材料调剂 +13 一样YWY 2026-04-03 14/700 2026-04-05 18:20 by 蓝云思雨
[考研] 材料0856 英一数二 323 求调剂 +14 袁sy 2026-04-01 14/700 2026-04-05 18:18 by cql1109
[考研] 求调剂到0856材料工程 +3 程9915 2026-04-05 3/150 2026-04-05 18:15 by 蓝云思雨
[考研] 考研调剂 +3 mcbbc 2026-04-04 3/150 2026-04-05 10:03 by barlinike
[考研] 313求调剂 +3 海日海日 2026-04-04 3/150 2026-04-05 07:48 by 544594351
[考研] 复试调剂 +6 范根培 2026-04-04 6/300 2026-04-04 14:27 by 土木硕士招生
[考研] 317分 一志愿江南大学 化学工程学硕 求调剂 +6 YinTai 2026-04-03 6/300 2026-04-03 22:30 by 无际的草原
[考研] 350一志愿北京航空航天大学08500材料科学与工程求调剂 +5 kjnasfss 2026-04-03 5/250 2026-04-03 22:29 by 无际的草原
[考研] 求调剂 +3 usbdndj 2026-04-03 3/150 2026-04-03 14:10 by dxiaoxin
[考研] 303求调剂 +3 一色清羽 2026-04-02 4/200 2026-04-03 10:22 by 蓝云思雨
[考研] 材料专硕322分 +11 哈哈哈吼吼吼哈 2026-04-01 11/550 2026-04-02 10:52 by lnilvy
[考研] 377求调剂 +3 RASKIN 2026-04-02 3/150 2026-04-02 09:45 by zzchen2000
[考研] 085404 22408 315分 +5 zhuangyan123 2026-03-31 6/300 2026-03-31 13:48 by limeifeng
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭