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lxy4ytu

新虫 (初入文坛)

[求助] western blot封闭液用的水配置,对实验结果会有影响吗

各位师兄师姐,我最近刚接触western blot,我们这用的封闭液是奶粉液,配置奶粉时误用水配置的,没用tbst液配置。更要命的是,我已经加完一抗了,并且加一抗时用的溶液也是误配的奶粉。在加二抗前才发现奶粉配置错误。如果继续做实验会对实验结果有影响吗?我现在应该如何弥补?
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ybs007

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
小丹木木: 金币+4, 鼓励热心应助 2012-09-24 08:12:00
lxy4ytu: 金币+6, ★★★很有帮助 2012-10-16 11:04:27
因为不知道你具体的实验所以无法给你明确的答案。但是可以给你点儿分析。你现在的问题是TBST换成了水,TBST成分有tris,tween20,Nacl,其中里面的关键成分就是tween20,tween20的作用在于它是一种非离子去污剂,能够复性抗原,提高特异性。因此,缺少了tween20会导致特异性降低,使背景加深。
你可以把错误的封闭液换掉,用正确的封闭液继续封闭。然后继续你的步骤。
平生我自知
2楼2012-09-22 16:13:56
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mamadexiao

木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
lxy4ytu: 金币+4, ★★★很有帮助 2012-10-16 11:04:39
就一次而已么,下次再做好呗
吃一堑长一智么。。。没事
3楼2012-09-22 20:50:44
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永峰1230

铜虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by ybs007 at 2012-09-22 16:13:56
因为不知道你具体的实验所以无法给你明确的答案。但是可以给你点儿分析。你现在的问题是TBST换成了水,TBST成分有tris,tween20,Nacl,其中里面的关键成分就是tween20,tween20的作用在于它是一种非离子去污剂,能 ...

请问,,封闭液 ,能使用 tween20吗?    见有人说 使用吐温20就可以,,没有说 怎么配制??
12
4楼2014-04-12 19:32:41
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