应《网络安全法》要求，自2017年10月1日起，未进行实名认证将不得使用互联网跟帖服务。为保障您的帐号能够正常使用，请尽快对帐号进行手机号验证，感谢您的理解与支持！

24小时热门版块排行榜    

小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 请教为什Western Blot一定要用两种抗体？
91/1返回列表
查看: 4653  |  回复: 8
只看楼主 @他人 存档 新回复提醒 (忽略) 收藏    在APP中查看

Gloria001

铁杆木虫 (正式写手)

[求助] 请教为什Western Blot一定要用两种抗体？ 已有3人参与

通常Western Blot中都使用两种抗体进行显色，为什么不能用一种呢？例如直接用连接了HRP的抗体检测抗原，然后显色呢？
请高手指点！
回复此楼

» 收录本帖的淘帖专辑推荐

蛋白质生物学实验经验

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:
1楼 2014-07-07 09:37:11
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

hkqgeoffrey

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流！ 2014-07-07 13:11:43
Gloria001: 金币+1, ★有帮助 2014-07-08 14:07:06
楼主说到的是两种可行的不同方法，前者是印迹，后者是ELISA的原理方法，但其实都涉及两种抗体的，楼主在查一下资料吧
赞一下 回复此楼
兴趣是第一导师，我爱它，因此我毫无疲倦的探索
2楼2014-07-07 10:19:14
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

gyesang

荣誉版主 (著名写手)

优秀版主优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Gloria001: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-08 14:06:34
你说的是可以的啊，可以直接在一抗上做标记，比如HRP或者AP，但是这样做成本很高，相对而言在二抗上做标记，也就标记那么几种
赞一下 回复此楼
学术问题讨论咨询发邮件gyesang@163.com
3楼2014-07-07 13:12:57
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

biotech_zhou

木虫 (著名写手)

待人以诚：专业/专注/专心

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
Gloria001: 金币+2, ★★★很有帮助 2014-07-08 14:06:46
1.降低成本；2.放大信号，提高检测的灵敏度。
赞一下 回复此楼
年末优惠荧光定量pcr、WB、ELISA技术服务一律六折！交流锤炼知识，用心构筑桥梁，以更优质的产品及技术服务助力科研；QQ：2513165427；Email：b
4楼2014-07-08 11:20:06
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

简牧风爱

新虫 (初入文坛)
这个当然是可以的，二抗孵育可放大信号
赞一下 回复此楼
5楼2014-07-12 19:07:43
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

pengchenping

铁虫 (初入文坛)
可以啊，只是选择问题啦

[ 发自小木虫客户端 ]
赞一下 回复此楼
6楼2014-07-14 12:42:22
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragon2013

新虫 (初入文坛)
其他人都说了用两种抗体的作用，放大信号。也可以用一种，在目的蛋白中加上生物素标签，利用链霉素亲和的抗体（Streptavidin-HRP）就可以。但会有以一下问题：1.在用脱脂奶粉时会出现一些背景，因为在脱脂奶粉中会有生物素化的成分。2.会出现非特异条带，在提取蛋白中出目的条带外也会出现其他的生物素化的蛋白。
利用链霉素亲和的抗体，主要用于蛋白分离纯化，因为生物素化的蛋白与Streptavidin的作用较强可以使用更为剧烈的条件，例如可以将SDS达到1%洗脱。现在好多研究蛋白相互作用的都使用这种方法。
赞一下(1人) 回复此楼
7楼2014-07-22 20:09:58
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

Gloria001

铁杆木虫 (正式写手)
引用回帖:
7楼: Originally posted by dragon2013 at 2014-07-22 20:09:58
其他人都说了用两种抗体的作用，放大信号。也可以用一种，在目的蛋白中加上生物素标签，利用链霉素亲和的抗体（Streptavidin-HRP）就可以。但会有以一下问题：1.在用脱脂奶粉时会出现一些背景，因为在脱脂奶粉中会有 ...

谢谢，说明很详细。
回复此楼
8楼2014-07-24 09:34:40
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

dragon2013

新虫 (初入文坛)
为了信号放大
回复此楼
9楼2016-07-19 10:16:48
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 Gloria001 的主题更新
91/1返回列表
普通表情 龙 兔 虎 猫
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 085601材料工程专硕求调剂 +3 慕寒mio 2026-03-16 3/150 2026-03-17 13:46 by houyaoxu
[考研] 08工科 320总分 求调剂 +4 梨花珞晚风 2026-03-17 4/200 2026-03-17 13:38 by houyaoxu
[考研] 304求调剂 +7 小熊joy 2026-03-14 7/350 2026-03-17 08:53 by 雾散后相遇lc
[基金申请] 国自科面上基金字体 +6 iwuli 2026-03-12 7/350 2026-03-16 21:18 by sculhf
[考研] 333求调剂 +3 文思客 2026-03-16 7/350 2026-03-16 18:21 by 文思客
[考研] 070303一志愿西北大学学硕310找调剂 +5 d如愿上岸 2026-03-12 8/400 2026-03-16 15:19 by peike
[考研] 070303 总分349求调剂 +3 LJY9966 2026-03-15 5/250 2026-03-16 14:24 by xwxstudy
[考研] 288求调剂 +4 奇点0314 2026-03-14 4/200 2026-03-14 23:04 by JourneyLucky
[考研] 材料工程327求调剂 +3 xiaohe12w 2026-03-11 3/150 2026-03-14 20:20 by ms629
[考研] 297求调剂 +4 学海漂泊 2026-03-13 4/200 2026-03-14 11:51 by 热情沙漠
[考研] 材料080500调剂求收留 +3 一颗meteor 2026-03-13 3/150 2026-03-14 10:54 by peike
[考研] 332求调剂 +3 zjy101327 2026-03-11 6/300 2026-03-13 22:48 by JourneyLucky
[考研] 材料工程调剂 +9 咪咪空空 2026-03-12 9/450 2026-03-13 22:05 by 星空星月
[考研] 26调剂/材料/英一数二/总分289/已过A区线 +6 步川酷紫123 2026-03-13 6/300 2026-03-13 21:59 by 星空星月
[考研] 四川大学085601材料工程专硕 初试294求调剂 +4 祝我们好在冬天 2026-03-11 4/200 2026-03-13 21:39 by peike
[考研] 材料与化工085600调剂求老师收留 +9 jiaanl 2026-03-11 9/450 2026-03-13 20:22 by JourneyLucky
[考研] 求调剂 +5 一定有学上- 2026-03-12 5/250 2026-03-13 18:31 by ms629
[考研] 工科278分求调剂 +5 周慢热啊 2026-03-12 7/350 2026-03-13 15:49 by JourneyLucky
[考研] 0856化工原理 +6 z2839474511 2026-03-10 6/300 2026-03-13 10:41 by houyaoxu
[考研] 08食品或轻工求调剂，本科发表3篇sci一区top论文，一志愿南师大食品科学与工程 +3 我是一个兵， 2026-03-10 3/150 2026-03-13 10:21 by Yuyi.
信息提示
关闭
请填处理意见
关闭