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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » PCR相关 » 指导如何设计相关引物来获得酶的基因片段
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well_想太多

新虫 (小有名气)

[求助] 指导如何设计相关引物来获得酶的基因片段 已有1人参与

筛出一株菌，想要获得其中的一种酶的基因，但是此种酶不一定只有一种，我查找了一下此菌种大概可以表达不下十种这种酶，所以我该如何设计引物来获得这个酶的基因序列呢？

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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1楼 2014-07-06 12:48:36
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飞约疯人院

专家顾问 (著名写手)

科学怪人

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
well_想太多(西门吹雪170代发): 金币+3, 鼓励回帖交流 2014-07-06 17:49:48
到NCBI找出菌种可以表达的十种酶的所有序列，然后用软件进行比对，序列分别标记为ABCDEFGH等等，找出A和其它都不同的地方设计引物以筛选A，然后找出B和其它都不同的地方设计引物以筛选B，片段长度控制在140-250之间，以此类推，就哦了。
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人生贵在行动，迟疑不决时，不妨先迈出小小一步。
2楼2014-07-06 16:22:53
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well_想太多

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by 飞约疯人院 at 2014-07-06 16:22:53
到NCBI找出菌种可以表达的十种酶的所有序列，然后用软件进行比对，序列分别标记为ABCDEFGH等等，找出A和其它都不同的地方设计引物以筛选A，然后找出B和其它都不同的地方设计引物以筛选B，片段长度控制在140-250之间 ...

可是我只要其中一种酶的基因就够了,不非得每种都得到.如果这样的话,我是不是只要根据A的序列设计引物就够了?还请问下,为什么片段要控制在140-250之间呢?
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3楼2014-07-06 20:55:07
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well_想太多

新虫 (小有名气)
怎么没有人回答了呢?
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4楼2014-07-08 10:50:25
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