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icedshell

木虫 (正式写手)

[求助] 液相色谱基线漂移 已有3人参与

各位高手,在205nm波长下检测(流动相是乙腈和水,梯度洗脱),色谱峰拖尾,加甲酸后拖尾峰没了,但是基线出现严重负漂移,等度洗脱则没有漂移问题,后面还要进质谱又不能换磷酸,柱子清洗过了,其他波长下也没有漂移问题。请问各位高手应该如何解决这个问题,谢谢。

液相色谱基线漂移
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icedshell

木虫 (正式写手)

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2楼: Originally posted by xiaofei_lu at 2014-07-05 07:13:37
10mM浓度的甲酸的紫外cutoff是210nm。你用的检测波长是205nm,这个波长下甲酸的吸收也很强。我用过乙酸,发现在pH和乙酸浓度不变的情况下改变乙腈和水的比例,流动相的紫外吸收是变化的,乙腈的比例越高,流动相的吸 ...

您好,谢谢。分离的就是图里的那几个主要的峰。因为分析的物质极性小,紫外吸收也很弱,就仅在190-220nm之间,乙腈的比例用的很大,初始的就是从80%开始的,等度分离度有不好。再请问下,如果换乙酸的话会不会好一些,还是也差不多?
3楼2014-07-05 10:04:55
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icedshell

木虫 (正式写手)

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4楼: Originally posted by kf1009 at 2014-07-05 12:30:17
你在乙腈里加入等量的甲酸试试看有没有效果,如果不影响分离和峰型,可以降低甲酸的量试试。另你上LC-MS用什么离子源,质谱信号强吗?

降低甲酸量,基线好很多的。图谱相对能行,带酚羟基的几个峰还有些略微拖尾。质谱是ESI源,现在还没上,现在色谱条件差不多了,准备上了。

另外想请教您一下,在乙腈里加入甲酸是有什么效果,在一些文献中看到过,但不是很理解。
8楼2014-07-07 01:13:54
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icedshell

木虫 (正式写手)

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12楼: Originally posted by jinianwei at 2014-07-07 10:42:56
常用的甲酸乙酸,甲酸铵乙酸铵等,水相和有机相都可以添加,浓度不要太高,10M以下吧。两个有机相添加浓度都一样,在DAD上就没有漂移了。

嗯,长见识了,非常感谢。
13楼2014-07-09 11:09:17
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