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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 生物科学 » 蛋白电泳/WB » 可溶性蛋白在沉淀里面，不在上清液肿么办啊
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知之为知之a

新虫 (初入文坛)

[求助] 可溶性蛋白在沉淀里面，不在上清液肿么办啊已有10人参与

做了好几次SDS-PAGE，设计的可溶性蛋白经过细胞破碎后，只发现在下层沉淀里面有表达的诱导蛋白，诱导温度30摄氏度，IPTG浓度0.5mM.时间5个小时。
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知之为知之
1楼2014-06-18 08:19:30
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anyaxiong

铁杆木虫 (知名作家)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
低温过夜诱导，在诱导前将对数期的菌液10到15℃预冷半小时试试
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爱拼才会赢
3楼2014-06-20 22:27:32
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
降低温度到18度，IPTG降低到0.1mM, 过夜诱导试试看？
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行至水穷处，坐看云起时
2楼2014-06-18 21:46:46
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sqd767019087

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
裂解buffer  ph   诱导温度 诱导od  菌有么有破碎完全

[ 发自小木虫客户端 ]
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4楼2014-06-21 00:18:48
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exon2002

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
两个办法：第一，助溶，改变生产和溶解条件，使原来不溶变成溶；第二，变性蛋白收集，然后复性。
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5楼2014-06-21 06:32:45
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