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元一妄

金虫 (小有名气)

[求助] 有图,微生物蛋白12%的胶,就成这样子了,求助 已有2人参与

点的样都是一样的,考马斯亮蓝染色,就成这了,脱色剂染色剂都是实验室其他人用的,脱色剂1:4:5的乙酸:乙醇:水,没有出现明显的条带,只中间有两个稍微亮的区域

有图,微生物蛋白12%的胶,就成这样子了,求助
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
元一妄: 金币+3, 有帮助 2014-06-17 10:23:11
元一妄: 金币+3, 有帮助 2014-06-17 10:24:07
你好像没点Marker吧,不好判断是胶的问题还是蛋白的问题。先点个Marker跑一下,再来找原因。
2楼2014-06-07 09:27:22
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元一妄

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-07 09:27:22
你好像没点Marker吧,不好判断是胶的问题还是蛋白的问题。先点个Marker跑一下,再来找原因。

没有,只想看看蛋白的分布
3楼2014-06-07 09:41:35
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aloha

金虫 (小有名气)

应该是电泳出问题了吧,认认真真配一次SDS-PAGE重新做吧 蛋白样品也需要重新制备
信仰科学,文献无界
4楼2014-06-07 17:56:20
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元一妄

金虫 (小有名气)

引用回帖:
4楼: Originally posted by aloha at 2014-06-07 17:56:20
应该是电泳出问题了吧,认认真真配一次SDS-PAGE重新做吧 蛋白样品也需要重新制备

重跑了一次,10%的胶,还是这样子,刚出浓缩胶有明显的亮,没有带啊关键是
5楼2014-06-08 08:54:07
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元一妄

金虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-07 09:27:22
你好像没点Marker吧,不好判断是胶的问题还是蛋白的问题。先点个Marker跑一下,再来找原因。

点了marker,还是这样子,难道样品制备的问题?
6楼2014-06-08 08:55:58
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
6楼: Originally posted by 元一妄 at 2014-06-08 08:55:58
点了marker,还是这样子,难道样品制备的问题?...

如果marker跑得没问题,那就必然是样品的问题了,感觉你的样品像是降解了,不知你怎么提的蛋白?
7楼2014-06-08 09:01:11
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jurkat.1640

至尊木虫 (文坛精英)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与,应助指数 +1
元一妄: 金币+2, 有帮助 2014-06-17 10:23:38
引用回帖:
6楼: Originally posted by 元一妄 at 2014-06-08 08:55:58
点了marker,还是这样子,难道样品制备的问题?...

如果预染marker也是这样,一定是胶的问题。
8楼2014-06-08 10:03:39
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元一妄

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 逍潇 at 2014-06-08 09:01:11
如果marker跑得没问题,那就必然是样品的问题了,感觉你的样品像是降解了,不知你怎么提的蛋白?...

只用哺乳动物组织抽提液提的
9楼2014-06-08 17:33:12
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逍潇

铁杆木虫 (著名写手)

引用回帖:
9楼: Originally posted by 元一妄 at 2014-06-08 17:33:12
只用哺乳动物组织抽提液提的...

你的标题写的是微生物蛋白,用哺乳动物组织抽提液会有问题吧
10楼2014-06-08 18:25:34
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