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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 【求助/交流】配制酪蛋白培养基 干酪素不溶解
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)

[交流] 【求助/交流】配制酪蛋白培养基 干酪素不溶解

求助各位，我将干酪素加在营养琼脂里面有大量沉淀。出现这种现象可以倒平板吗？
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1楼 2011-04-08 10:50:04
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
★ ★
nancyyazi(金币+1):谢谢参与
rainwander(金币+1): 鼓励交流！！！ 2011-04-12 19:59:08
我也配过干酪素的溶液，加热，搅拌各种方法都溶不了，后来发现溶液的ph恰好是干酪素的等电点，加点碱就化了，你把干酪素溶解到弱碱溶液里，再按比例加到培养基中即可
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2楼2011-04-08 11:15:18
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jennydersiry at 2011-04-08 11:15:18:
我也配过干酪素的溶液，加热，搅拌各种方法都溶不了，后来发现溶液的ph恰好是干酪素的等电点，加点碱就化了，你把干酪素溶解到弱碱溶液里，再按比例加到培养基中即可

我把pH都调到8.5了 还是有沉淀 我倒平板的时候是摇匀了再倒还是倒上清
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3楼2011-04-08 13:44:01
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jingcao3081

铁杆木虫 (职业作家)
★
nancyyazi(金币+1):谢谢参与
可能需要用PH计来调节酸碱值！祝你好运！
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4楼2011-04-08 14:07:00
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by jingcao3081 at 2011-04-08 14:07:00:
可能需要用PH计来调节酸碱值！祝你好运！

我是用pH计来调的，可是不知道怎么回事？
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5楼2011-04-08 14:21:35
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jennydersiry

金虫 (小有名气)
楼主，你加热了吗，干酪素可以沸水浴加热到一个小时以上，而且调节ph时是要先加碱再加水的
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6楼2011-04-08 18:43:27
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
Originally posted by nancyyazi at 2011-04-08 14:21:35:
我是用pH计来调的，可是不知道怎么回事？

要加热一个小时啊，我是加碱了，而且也加热溶解了。如果培养基里面只加琼脂和酪蛋白沉淀会少一些，往里面再加牛肉膏蛋白胨什么的沉淀就很多，我不明白这是为什么？
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7楼2011-04-12 13:37:47
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胡小喜

新虫 (小有名气)
★
nancyyazi(金币+1): 谢谢参与
我也发现这个问题了。我先是用碱把酪蛋白融了，可是一旦与蛋白胨葡萄糖等混合就出现沉淀了，灭菌之后还是很多沉淀，这个怎么办啊！影响酪蛋白的性质吗？我要筛的是产蛋白酶细菌，求高人指点啊
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8楼2012-08-02 13:09:07
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nancyyazi

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
1272425楼: Originally posted by 胡小喜 at 2012-08-02 13:09:07
我也发现这个问题了。我先是用碱把酪蛋白融了，可是一旦与蛋白胨葡萄糖等混合就出现沉淀了，灭菌之后还是很多沉淀，这个怎么办啊！影响酪蛋白的性质吗？我要筛的是产蛋白酶细菌，求高人指点啊

先把除酪蛋白外的培养基煮沸，然后酪蛋白加氢氧化钠煮沸，趁热加入到培养基里面。然后灭菌，灭菌完了还是会有沉淀，你不要摇动培养基直接拿上清液倒平板就可以了。
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975925109
9楼2012-08-05 19:11:43
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975925109

铁虫 (初入文坛)
★
nancyyazi(金币+1): 谢谢参与
送鲜花一朵
引用回帖:
1272773楼: Originally posted by nancyyazi at 2012-08-05 19:11:43
先把除酪蛋白外的培养基煮沸，然后酪蛋白加氢氧化钠煮沸，趁热加入到培养基里面。然后灭菌，灭菌完了还是会有沉淀，你不要摇动培养基直接拿上清液倒平板就可以了。...

那请问，在高温高压情况下灭菌，还有煮沸，酪蛋白不会变性吗？这会不会影响它的性质和功效
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11楼2012-09-06 10:03:34
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renzhao_11

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
用酸水解干酪素或酶水解干酪素就可以了。全部澄清的，
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12楼2012-10-08 11:28:39
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可乐7红茶

银虫 (正式写手)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
引用回帖:
9楼: Originally posted by nancyyazi at 2012-08-05 19:11:43
先把除酪蛋白外的培养基煮沸，然后酪蛋白加氢氧化钠煮沸，趁热加入到培养基里面。然后灭菌，灭菌完了还是会有沉淀，你不要摇动培养基直接拿上清液倒平板就可以了。...

请问这样不影响透明圈的观察吗？
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13楼2013-07-23 16:00:46
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面包西瓜树

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
我配制的干酪素平板是澄清的，但是加入上清液之后就如加入三氯乙酸一样
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14楼2015-01-29 14:04:34
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国之伟

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问你后面是用了染剂来观察水解圈的吗？急求。谢谢
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15楼2015-11-19 14:09:21
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cl8682535

银虫 (小有名气)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
请问楼主是否找到了更好的方法？
最近我用奶粉配制培养基，筛选降解蛋白质的菌株，灭菌后就有成块的沉淀出现，准备换干酪素试试，我应该遇到了和楼主一样的问题。
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16楼2016-09-01 16:16:31
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strive12312310楼
2012-08-05 22:28   回复  
nancyyazi(金币+1): 谢谢参与
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