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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 核酸提取 » 这样的RNA能用于RT-PCR吗？
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胡乱走走2011

银虫 (著名写手)

[求助] 这样的RNA能用于RT-PCR吗？ 已有5人参与

如图所示，一是幼虫，二是干扰处理后的，所以量比较少。
测定浓度后，发现浓度和质量都不好，不知道能否反转录后用于RT-PCR检测？
请高手指点。

这样的RNA能用于RT-PCR吗？
RNA.png
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Things change, people grow.
1楼 2014-06-04 16:25:12
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cuiyangyan

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
感谢参与，应助指数 +1
胡乱走走2011(西门吹雪170代发): 金币+2, 鼓励回帖交流 2014-06-04 19:53:52
建议最好跑胶，如果胶上RNA的三条带均清晰，就可以进行RT-PCR，260/230偏低一般不会影响RT-，但可能影响反转时的定量。如果跑胶结果不佳的话，建议重新抽提。
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用每一次的尝试填满命运的空缺
2楼2014-06-04 16:31:05
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
这个值仅供参考，上图

[ 发自小木虫客户端 ]
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3楼2014-06-04 19:38:13
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youlinglyw

荣誉版主 (著名写手)

一匡天下

优秀版主

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
胡乱走走2011(kx444555代发): 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 12:46:10
个人感觉不太靠谱
你的rna质量差了些

建议重新做，然后找个靠谱的试剂盒提取RNA
当然，到了这一步，做反转也可以，

关键是，你自己能说服你自己吗？
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天行健
4楼2014-06-05 10:09:50
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liug268

金虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
kx444555: 金币+3, 鼓励交流 2014-06-05 12:46:14
260/280 在1.6-2.0之间的我都试过，问题不大。其余的建议重新提RNA，特别是要做RT-PCR的样品要求比较高，如果是钓cDNA那就无所谓了
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5楼2014-06-05 10:18:01
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麦兜丹丹

铜虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流经验！ 2014-06-25 20:29:08
我的经验是浓度太低和OD260/280比值低于1.7的 逆转录基本上效果很差 建议你重新提取
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6楼2014-06-25 18:35:01
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