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高效液相色谱的流动相问题
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gogoxiaobai
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高效液相色谱的流动相问题
已有3人参与
我最近在用反相色谱做实验,我的流动相A是2%乙腈水溶液,流动相B是60%乙腈水溶液,我走样品的谱图中有四个峰和我走溶剂出的谱图的四个峰是一致的,我尝试过冲洗柱子,冲洗系统,更换流动相,更换柱子,换过水,但是走溶剂都会出现这四个峰,但是其中我把流动相起始乙腈浓度变为20%乙腈水溶液时就没有那四个峰了,我实在想不出是什么问题了,是乙腈有问题么?请大家帮我分析下,感激不尽啦
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1楼
2014-05-25 17:56:38
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guangyuel
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【答案】应助回帖
可能是水相太高了,样品是用什么溶解的,是不是和流动相不容或差异较大,还有梯度洗脱流动相是不变化太快导致的
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6楼
2014-10-19 22:06:34
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南海猪
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【答案】应助回帖
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大量的水系溶解了柱子填充物~~~纯属猜想~~~~
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出来混,不是你帮我就是我帮你~~~
2楼
2014-05-25 19:09:26
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liangzhili
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【答案】应助回帖
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1. 要说明你用是哪一种色谱柱,一般的C18是不能长时间承受2%乙腈水溶液流动相的,普通C18柱子水的比例最高为95%,且不能长时间维持。只有部分特殊说明的柱子才能承受这么高比例水。否则你色谱柱的部分填料基质会溶出,可能出现你所描述的峰。
2. 要说明你是做的等度还是梯度洗脱。
3.流动相中气体没有脱干净也可能导致鬼峰的出现。
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努力就有机会!
3楼
2014-05-25 20:06:02
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gogoxiaobai
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3楼
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Originally posted by
liangzhili
at 2014-05-25 00:06:02
1. 要说明你用是哪一种色谱柱,一般的C18是不能长时间承受2%乙腈水溶液流动相的,普通C18柱子水的比例最高为95%,且不能长时间维持。只有部分特殊说明的柱子才能承受这么高比例水。否则你色谱柱的部分填料基质会溶出 ...
我用的C18色谱柱,我试过起始2%的,也试过起始5%的,进的溶剂都有四个峰,我的洗脱方式是梯度洗脱,流动相现用现配过膜脱气,但都是还有,我好纠结,到底怎么回事呢?
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4楼
2014-05-25 20:14:22
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