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寂静之林

银虫 (小有名气)

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【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★
youlinglyw: 金币+5, BioEPI+1, 赠人玫瑰手有余香，生物科学有你更精彩！ 2014-06-07 09:10:58

我来尝试回答一下楼主的问题。
第一个问题，标准曲线的范围。对于标准曲线的最低检出量，其实有至少两种方法可以确定的。第一，理论上的最低检出量，这个可以通过计算来确定，这是夹心法，将阴性对照的OD值+2SD（阴性对照OD值的标准差），计算出来的OD值代入拟合出来的标准曲线，就是理论上的最低检出限；第二，将阳性对照用阴性对照进行对倍稀释，稀释N次之后，每个稀释度做10个复孔，计算每个稀释度10个复孔OD值的精密性（CV%值），如果再第N次稀释的CV%大于15%，则第N-1次稀释时的浓度，就是最低检出限。其他的方法，我也不太清楚了，但如果是作为标准曲线的第二个点的浓度（即零浓度之后的第一个浓度点），建议可能的话，就用cutoff值（临界值）作为其浓度。
第二个问题，血样的最佳稀释度。这个要根据血样里，待测物质的浓度来决定，如果待测物质的浓度在标准曲线的浓度范围里的话，血样不用稀释都可以，如果待测物质的浓度超出了标准曲线的线性范围，则把血样稀释至线性范围内就行了。
补充一下，以血清为基质，把待测物质按一定的浓度加入到血清里，进行检测。我觉得这是测定试剂的回收率，是判断试剂准确度的标准之一，是定量试剂准确性评价的一种重要方法。

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3楼2014-06-06 21:05:08

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