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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 药代动力学 » 求教用HPLC法测血药浓度做药时曲线，线性范围应该怎样确定？
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饺子813

铜虫 (小有名气)

[求助] 求教用HPLC法测血药浓度做药时曲线，线性范围应该怎样确定？

做小鼠体内厄洛替尼药动学研究，参考文献很少，不了解浓度变化大致在什么范围，看文献上说标准曲线的浓度范围是先配一个标准浓度，然后其他浓度就是它的50%——150%（好像是这个，记不太清了。。。）一共取7个左右的点。这里所说的标准浓度是怎么回事？怎样确定的？
另外线性范围的最下限要高于定量限，可是我做药时曲线的话吸收相最开始和消除相最末一两个点的浓度可能就很低，而且一条药时曲线浓度跨度那么大，有没有可能不在线性范围内？这样的话应该怎么办呢？
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1楼2013-03-18 16:31:46
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kkbyb

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
karl2100: 金币+2, 多谢指教！ 2013-03-18 23:47:19
饺子813: 金币+20, ★★★很有帮助, 谢谢！ 2013-03-19 11:05:31
1.表示没听说过标准浓度这个说法；
2.大概范围你不确定就去试；
3.测不到起始点或末端就想办法改进，或者检测方法不合理，如果数据够用没有也未尝不可；
4.标曲跨度在两个数量级很正常，当然也有可能不在线性内，那就稀释样品或两条标曲
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2楼2013-03-18 22:19:02
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
我记得这里原来有帖子讨论过这个问题
我的看法是：药动学标曲线性范围的下限是仪器的定量限，上限则要取两只动物来预试，据其所能到达的最高血药浓度来定。
至于什么标准浓度，从没听说过，谁能解释一下？
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饺子813
3楼2013-03-19 03:16:11
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星星的眼睛

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
2楼: Originally posted by kkbyb at 2013-03-18 22:19:02
1.表示没听说过标准浓度这个说法；
2.大概范围你不确定就去试；
3.测不到起始点或末端就想办法改进，或者检测方法不合理，如果数据够用没有也未尝不可；
4.标曲跨度在两个数量级很正常，当然也有可能不在线性内， ...

正解，楼主好好学习下吧，呵呵
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4楼2013-03-19 08:16:26
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梦不落张

铜虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈林霖 at 2013-03-19 03:16:11
我记得这里原来有帖子讨论过这个问题
我的看法是：药动学标曲线性范围的下限是仪器的定量限，上限则要取两只动物来预试，据其所能到达的最高血药浓度来定。
至于什么标准浓度，从没听说过，谁能解释一下？

如果动物预试试验测的最高血药浓度达到30ug/ml，最低5ng/ml，怎么定标准曲线范围呢？最低定量下限0.5ng/ml。
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5楼2013-03-19 10:52:37
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饺子813

铜虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by kkbyb at 2013-03-18 22:19:02
1.表示没听说过标准浓度这个说法；
2.大概范围你不确定就去试；
3.测不到起始点或末端就想办法改进，或者检测方法不合理，如果数据够用没有也未尝不可；
4.标曲跨度在两个数量级很正常，当然也有可能不在线性内， ...

之前也看到很多您回复的有关这方面的帖子，受益良多啊！
我以前看的文献是用HPLC测药片中某成分的含量，这个含量一般有个标准，好像称为目标浓度，然后标准曲线的浓度范围就可以以这个浓度为依据上下浮动一下（80%~120%）但是测血药浓度没有这样一个目标浓度，我就感觉标准曲线的浓度范围缺少基准，配多大范围心里没数。。。
我想以定量限为最低浓度，然后成倍依次增加，到跨越三个数量级为上限先试试，您看这样可以吗？
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6楼2013-03-19 12:13:22
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饺子813

铜虫 (小有名气)
送鲜花一朵
引用回帖:
3楼: Originally posted by 陈林霖 at 2013-03-19 03:16:11
我记得这里原来有帖子讨论过这个问题
我的看法是：药动学标曲线性范围的下限是仪器的定量限，上限则要取两只动物来预试，据其所能到达的最高血药浓度来定。
至于什么标准浓度，从没听说过，谁能解释一下？

非常感谢您的指点！标准浓度是我自己随便叫的，以前看到有叫目标浓度的，但是血浆中药物含量测定没有目标浓度，我想这个目标浓度就像个标准参照浓度一样，就这样叫了~
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7楼2013-03-19 12:19:49
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陈林霖

至尊木虫 (正式写手)
引用回帖:
5楼: Originally posted by 梦不落张 at 2013-03-19 10:52:37
如果动物预试试验测的最高血药浓度达到30ug/ml，最低5ng/ml，怎么定标准曲线范围呢？最低定量下限0.5ng/ml。...

那标曲的下限就定为0.5ng/ml，上限定为60或更高，因为你必须尽量保证正式实验中个体差异造成的超出预试浓度范围的值也落在标曲范围内
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8楼2013-03-19 21:34:43
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卢平

木虫 (小有名气)
我怎么记得原来做的时候用内标法呀
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9楼2013-03-20 09:23:13
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iambaggio11

新虫 (初入文坛)
先做预实验吧。先走一针标准品，内标法简单估算一下。然后看一下最后采集的那个样品浓度（最后一次血药浓度最低吧）是多少，做标准曲线的时候下限比这个小就可以，上限同理，只要大于你初次采血样品浓度就可以。
当然也可以调整进样量来进行估算。
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10楼2013-03-20 09:46:25
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