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点突变 求助
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最近做点突变 按照互补pcr法做 1、 根据现有基因设计引物; 2、 合成引物并准备好模板; 3、 PCR, 4、 DpnI处理酶切产物; 5、 转化酶切产物; 6、 筛选 阳性克隆; 7、 送测序并测全长。 筛选后长菌 菌液pcr个别能p出目的条带 大部分却p不出来 之后提出质粒 跑电泳出现问题: 通过条带发现:比我原来连t载的长度要长很多(目的片段连完T载是4kb 而我这提完质粒跑完电泳 却6kd) 而且浓度很低 请问是什么原因 |
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yuguiyan
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