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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » DNA重组 » 点突变 求助
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麻大力

新虫 (初入文坛)

[求助] 点突变 求助

最近做点突变 按照互补pcr法做
1、 根据现有基因设计引物；
2、 合成引物并准备好模板；
3、 PCR，
4、 DpnI处理酶切产物；
5、 转化酶切产物；
6、 筛选 阳性克隆；
7、 送测序并测全长。

筛选后长菌 菌液pcr个别能p出目的条带 大部分却p不出来   之后提出质粒 跑电泳出现问题： 通过条带发现：比我原来连t载的长度要长很多（目的片段连完T载是4kb 而我这提完质粒跑完电泳 却6kd） 而且浓度很低 请问是什么原因
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1楼 2014-05-19 00:16:20
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yuguiyan

至尊木虫 (文坛精英)
质粒切开看的大小吗？

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2楼2014-05-19 01:06:24
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麻大力

新虫 (初入文坛)
都没有切
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3楼2014-05-21 11:02:13
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