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574759350

铁虫 (小有名气)

[求助] 点突变对蛋白功能有没有影响? 已有4人参与

我正在构建一重组蛋白,构建好之后测序发现序列有一个碱基发生突变,氨基酸由原来的丝氨酸突变为脯氨酸,不知道这样会对目的蛋白的表达产生影响么?是通过什么方法预测?
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d00614028

银虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

★ ★
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574759350(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-11 21:30:43
574759350: 金币+1 2014-04-16 08:33:30
如果这个重组蛋白是用于后续的实验,还是通过引物用扩环的方法来修复一下吧,别折腾来看是否有影响了,修复也就一步的事情。
2楼2014-04-11 10:04:20
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Neo2000

木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★ ★
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574759350(西门吹雪170代发): 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-11 21:30:58
574759350: 金币+1 2014-04-16 08:33:39
很难说会不会有影响,重新构载体比较好

[ 发自小木虫客户端 ]
3楼2014-04-11 10:40:52
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zhangjane694

金虫 (正式写手)

【答案】应助回帖


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西门吹雪170: 金币+1, 鼓励回帖交流 2014-04-11 21:31:07
氨基酸的性质发生明显变化,最好重新构建比较保险,否则后续试验不好进行呀。
jane
4楼2014-04-11 20:30:29
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pennchem

专家顾问 (正式写手)

【答案】应助回帖

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574759350: 金币+1 2014-04-16 08:33:50
gyesang: 金币+2, 鼓励回帖交流! 2014-04-30 14:05:42
综合而言,变成脯氨酸不是一个好的讯号,如果看看20个氨基酸,只有脯氨酸会引起蛋白的折叠方向变化。

如果该部位发生在活性,或者底物结合部位或附近,建议定点突变回去

否则,可以试试,不过如果发表论文,遇到评委问起,很难解释。
行至水穷处,坐看云起时
5楼2014-04-11 22:31:43
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