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worm2010

金虫 (小有名气)


[交流] 【求助/交流】关于蛋白质突变的问题

请问各位兄弟姐妹,如果研究一种酶,想通过突变的方法提高其活性,是需要对它的活性中心位点进行突变?还是活性中心位点附近进行突变?还是离活性中心位点之外的其他地方进行突变呢?
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王会征

铁杆木虫 (著名写手)


worm2010(金币+2): 2011-01-14 11:06:38
提高活性的突变比较难,一般是随机突变筛选突变体看哪个活性提高,只有检测到活性提高后才能确认哪个突变是有效的,如果是想降低或缺失活性突变嘛就比较简单了。
2楼2011-01-14 10:33:35
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worm2010(金币+2): 2011-01-14 11:07:10
活性位点突变实验基本上都会使酶活降低或者消失的,这个就不要试了。
3楼2011-01-14 10:43:44
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worm2010

金虫 (小有名气)


引用回帖:
Originally posted by brightfuture01 at 2011-01-14 10:43:44:
活性位点突变实验基本上都会使酶活降低或者消失的,这个就不要试了。

那想要提高酶活力的话,突变肯定是不行了呗?
4楼2011-01-14 11:06:18
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引用回帖:
Originally posted by worm2010 at 2011-01-14 11:06:18:

那想要提高酶活力的话,突变肯定是不行了呗?

不是说突变不行,估计要建随机突变库来筛高酶活的克隆。不行的是活性位点的突变。
5楼2011-01-14 11:07:37
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rainwander

铁杆木虫 (知名作家)


用定向进化的方法,构建突变文库,高通量筛选
6楼2011-01-14 14:24:30
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随机突变,建立突变文库,定向筛选。
7楼2011-01-14 16:11:03
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