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撒的发生地方

铁虫 (初入文坛)

应助: 0 (幼儿园)
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虫号: 2800870
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专业: 细胞周期与调控

[求助] 植物rna提取已有3人参与

为什么拿RNAiso Plus 试剂盒提种子rna。异丙醇沉降后沉淀不溶解呢？电泳只有5s条带。氯仿抽提两次，而且用30%乙醇去多糖了啊。求解。

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1楼2014-05-13 19:20:36

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jiangleiyu

新虫 (初入文坛)

应助: 1 (幼儿园)
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专业: 果树学

【答案】应助回帖

有影响的。如果在裂解之前将乙醇直接加在裂解液中，一般会极大的影响裂解效果，这主要是由于大部分提取高糖植物RNA的试剂盒主要成分为ctab，ctab是溶于乙醇的；如果是裂解完成后加乙醇，就没什么特别大的影响了。30%的乙醇沉淀多糖的效果其实很有限且耗时长，所以建议用LiCl代替异丙醇进行沉淀，这样能够很好的解决去糖的问题。我们实验室基本都是用的终浓度为4mol/L的LiCl常温沉淀1.5h，效果比较好，但是起始加样量要大一些哈。