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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 微生物 » 实验/技术 » 细胞破碎 细菌
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徐国栋

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞破碎 细菌 已有5人参与

实验室条件下，如何把谷氨酸棒状杆菌（革兰氏阳性菌）迅速搞死并且破碎掉，因为要测胞内氨基酸的量。
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自我选择，自我努力，自我突破
1楼 2014-04-17 16:38:45
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回帖支持 ( 显示支持度最高的前 50 名 )

hbtmsw

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
谷氨酸棒状杆菌，你是发酵蛋氨酸么？
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0，PH8.0buffer补足至10毫升，离心取上清测定。
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徐国栋
5楼2014-04-18 20:04:43
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普通回帖

qiuwenjun09

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖

★
感谢参与，应助指数 +1
徐国栋: 金币+1 2014-04-18 11:14:14
采用高速粉碎作用的高速组织捣碎机就可以了
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早起的鸟儿
2楼2014-04-17 16:46:25
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

【答案】应助回帖

感谢参与，应助指数 +1
用超声波把他吵死。用高压匀质机把它碾死。
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曾经有人问我为什么要学微生物，我只是想离生命的本质更近一点。
3楼2014-04-17 17:40:02
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徐国栋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
2楼: Originally posted by qiuwenjun09 at 2014-04-17 16:46:25
采用高速粉碎作用的高速组织捣碎机就可以了

实验室没有
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自我选择，自我努力，自我突破
4楼2014-04-18 11:13:27
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徐国栋

新虫 (小有名气)
送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-18 20:04:43
谷氨酸棒状杆菌，你是发酵蛋氨酸么？
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0，PH8.0buffer补足至10毫升，离心取上清测定。

pH8.0的buffer什么成分？用这个方法，菌体的破碎率是多少？
这个方法用时比较长吧
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自我选择，自我努力，自我突破
6楼2014-04-28 09:34:27
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徐国栋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
5楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-18 20:04:43
谷氨酸棒状杆菌，你是发酵蛋氨酸么？
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0，PH8.0buffer补足至10毫升，离心取上清测定。

这个氢氧化钠的量和菌体量有关吧   如何确定他们之间的联系？
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自我选择，自我努力，自我突破
7楼2014-04-28 10:19:51
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小章要考研

新虫 (小有名气)
溶菌酶处理，纤维素酶。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
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8楼2014-04-28 12:21:56
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hbtmsw

木虫 (小有名气)
引用回帖:
7楼: Originally posted by 徐国栋 at 2014-04-28 10:19:51
这个氢氧化钠的量和菌体量有关吧   如何确定他们之间的联系？...

buffer 是磷酸缓冲液，破碎率我没关注过，估计是完全破碎了，离心后基本看不到菌体，只有及少量蛋白之类的透明沉淀。菌体量的话我们用的10mL OD值大于2.0的菌液用2mL氢氧化钠能完全破碎，你如果要精细对应的话得自己去做做梯度看看。
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9楼2014-04-28 13:25:49
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徐国栋

新虫 (小有名气)
引用回帖:
9楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-28 13:25:49
buffer 是磷酸缓冲液，破碎率我没关注过，估计是完全破碎了，离心后基本看不到菌体，只有及少量蛋白之类的透明沉淀。菌体量的话我们用的10mL OD值大于2.0的菌液用2mL氢氧化钠能完全破碎，你如果要精细对应的话得自 ...

求相关文献  谢谢
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自我选择，自我努力，自我突破
10楼2014-04-28 16:31:01
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