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徐国栋

新虫 (小有名气)

[求助] 细胞破碎 细菌已有5人参与

实验室条件下,如何把谷氨酸棒状杆菌(革兰氏阳性菌)迅速搞死并且破碎掉,因为要测胞内氨基酸的量。
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hbtmsw

木虫 (小有名气)

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
谷氨酸棒状杆菌,你是发酵蛋氨酸么?
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0,PH8.0buffer补足至10毫升,离心取上清测定。

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5楼2014-04-18 20:04:43
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qiuwenjun09

铁杆木虫 (著名写手)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
徐国栋: 金币+1 2014-04-18 11:14:14
采用高速粉碎作用的高速组织捣碎机就可以了
早起的鸟儿
2楼2014-04-17 16:46:25
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xiaoamuchong

专家顾问 (职业作家)

科研工作者

【答案】应助回帖

感谢参与,应助指数 +1
用超声波把他吵死。用高压匀质机把它碾死。
曾经有人问我为什么要学微生物,我只是想离生命的本质更近一点。
3楼2014-04-17 17:40:02
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徐国栋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
2楼: Originally posted by qiuwenjun09 at 2014-04-17 16:46:25
采用高速粉碎作用的高速组织捣碎机就可以了

实验室没有
自我选择,自我努力,自我突破
4楼2014-04-18 11:13:27
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徐国栋

新虫 (小有名气)

送红花一朵
引用回帖:
5楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-18 20:04:43
谷氨酸棒状杆菌,你是发酵蛋氨酸么?
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0,PH8.0buffer补足至10毫升,离心取上清测定。

pH8.0的buffer什么成分?用这个方法,菌体的破碎率是多少?
这个方法用时比较长吧
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6楼2014-04-28 09:34:27
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徐国栋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
5楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-18 20:04:43
谷氨酸棒状杆菌,你是发酵蛋氨酸么?
我们这测蛋氨酸时菌体破碎是用2毫升4M氢氧化钠悬浮40℃温育1小时盐酸调ph至8.0,PH8.0buffer补足至10毫升,离心取上清测定。

这个氢氧化钠的量和菌体量有关吧   如何确定他们之间的联系?
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7楼2014-04-28 10:19:51
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小章要考研

新虫 (小有名气)

溶菌酶处理,纤维素酶。。。

[ 发自手机版 http://muchong.com/3g ]
8楼2014-04-28 12:21:56
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hbtmsw

木虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 徐国栋 at 2014-04-28 10:19:51
这个氢氧化钠的量和菌体量有关吧   如何确定他们之间的联系?...

buffer 是磷酸缓冲液,破碎率我没关注过,估计是完全破碎了,离心后基本看不到菌体,只有及少量蛋白之类的透明沉淀。菌体量的话我们用的10mL OD值大于2.0的菌液用2mL氢氧化钠能完全破碎,你如果要精细对应的话得自己去做做梯度看看。
9楼2014-04-28 13:25:49
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徐国栋

新虫 (小有名气)

引用回帖:
9楼: Originally posted by hbtmsw at 2014-04-28 13:25:49
buffer 是磷酸缓冲液,破碎率我没关注过,估计是完全破碎了,离心后基本看不到菌体,只有及少量蛋白之类的透明沉淀。菌体量的话我们用的10mL OD值大于2.0的菌液用2mL氢氧化钠能完全破碎,你如果要精细对应的话得自 ...

求相关文献  谢谢
自我选择,自我努力,自我突破
10楼2014-04-28 16:31:01
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