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jackchen129至尊木虫 (职业作家)
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【求助/交流】玻璃珠破碎细胞 已有5人参与
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我要用玻璃珠法破碎酵母细胞提取粗酶液，加入0.5mm玻璃珠后需要多大转速离心才能破碎细胞，并且不破坏酶结构？ 谢谢！！！ |
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小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
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| Cells were broken with 1/3 volume of ice-chilled glass beads (0.5 mm BioSpecProducts, Bartesville, OK, USA) by vortexing four times for 1 min with 1 min intervals in an ice bath and centrifuged for 10 min centrifugation (15,000g) to clarify the supernatant A 20–60 Al supernatant was used for enzyme assay. |
4楼2010-04-22 21:15:21
5楼2013-06-29 17:55:12
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1949stone: 金币+1, 可以分享一下文献出处啊 2013-07-01 08:07:08
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The samples were centrifuged at 3000×g for 10 min at 4 °C and the pellets suspended in 5 mL of 0.05 mol L-1 Tris-HCl buffer (pH 7.5). Suspended cells were then disrupted by submitting them to a vortex for 5 min, in the presence of 5 g of glass beads (0.5 mm diameter). The disruption period was 1 min separated by 30 s interval in an ice bath. Cell debris and glass beads were then removed by centrifugation for 10 min (3000×g, 4 °C) and the supernatant was used for determinations of enzyme activity. |
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肖-洋6楼2013-06-30 02:08:48
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9楼2013-06-30 20:34:03
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