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jackchen129

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】玻璃珠破碎细胞 已有5人参与

我要用玻璃珠法破碎酵母细胞提取粗酶液,加入0.5mm玻璃珠后需要多大转速离心才能破碎细胞,并且不破坏酶结构?

谢谢!!!
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jackchen129

至尊木虫 (职业作家)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 肖-洋 at 2013-06-29 12:47:30
楼主提取的粗酶液是什么性质的酶?我提取的酶的酶活性最大酶活性在PH为5,那重悬的缓冲液的PH用调节吗?还有楼主怎么检测细胞确实破壁成功了,用显微镜吗?观察有什么现象?谢谢!...

一些循环的key enzyme。针对不同的酶,具体步骤你可以找一些英语参考文献。
8楼2013-06-30 12:29:32
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塞外雨

金虫 (著名写手)

★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-04-09 17:46
我用这方法提基因组和质粒,就是加适量的玻璃粉,漩涡振荡一分钟,冰浴一分钟,重复几次吧,我一般6到8次。
有这方面的文章,可以看一下
只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
2楼2010-04-09 16:07:15
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)

来学习学习  呵呵
3楼2010-04-21 23:39:26
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)


小木虫(金币+0.5):给个红包,谢谢回帖交流
Cells were broken with 1/3 volume of ice-chilled glass beads (0.5 mm BioSpecProducts, Bartesville, OK, USA) by vortexing four times for 1 min with 1 min intervals in an ice bath and centrifuged for 10 min centrifugation (15,000g) to clarify the supernatant A 20–60 Al supernatant was used for enzyme assay.
4楼2010-04-22 21:15:21
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