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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 分子生物 » 综合其他 » 【求助/交流】玻璃珠破碎细胞
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jackchen129

至尊木虫 (职业作家)

[交流] 【求助/交流】玻璃珠破碎细胞 已有5人参与

我要用玻璃珠法破碎酵母细胞提取粗酶液，加入0.5mm玻璃珠后需要多大转速离心才能破碎细胞，并且不破坏酶结构？

谢谢！！！
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1楼 2010-04-09 15:02:40
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肖-洋

新虫 (初入文坛)
★
小木虫: 金币+0.5, 给个红包，谢谢回帖
送红花一朵
引用回帖:
6楼: Originally posted by jackchen129 at 2013-06-30 02:08:48
The samples were centrifuged at 3000×g for 10 min at 4 °C
and the pellets suspended in 5 mL of 0.05 mol L-1 Tris-HCl
buffer (pH 7.5). Suspended cells were then disrupted by
submitting them to a ...

楼主提取的粗酶液是什么性质的酶？我提取的酶的酶活性最大酶活性在PH为5，那重悬的缓冲液的PH用调节吗？还有楼主怎么检测细胞确实破壁成功了,用显微镜吗？观察有什么现象？谢谢！
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7楼2013-06-30 08:47:30
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塞外雨

金虫 (著名写手)
★ ★ ★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
amisking(金币+2): 2010-04-09 17:46
我用这方法提基因组和质粒，就是加适量的玻璃粉，漩涡振荡一分钟，冰浴一分钟，重复几次吧，我一般6到8次。
有这方面的文章，可以看一下
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只想找到关心我、在我犹豫时能给我判断的人
2楼2010-04-09 16:07:15
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xiaomi1208

金虫 (正式写手)
来学习学习  呵呵
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3楼2010-04-21 23:39:26
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yuanbo934

至尊木虫 (著名写手)
★
小木虫(金币+0.5):给个红包，谢谢回帖交流
Cells were broken with 1/3 volume of ice-chilled glass beads (0.5 mm BioSpecProducts, Bartesville, OK, USA) by vortexing four times for 1 min with 1 min intervals in an ice bath and centrifuged for 10 min centrifugation (15,000g) to clarify the supernatant A 20–60 Al supernatant was used for enzyme assay.
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4楼2010-04-22 21:15:21
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