24小时热门版块排行榜    

查看: 2446  |  回复: 13

yxh710

金虫 (小有名气)

[求助] 制备液相分离纯化样品溶解问题 已有5人参与

一个全保护的多肽,含有20个氨基酸,显碱性,疏水性的片段,不溶于乙腈,甲醇,水,溶于DMF,醋酸,但是加一定比例的乙腈/水很容易析出,取2mg的样品用200ul的醋酸溶解后用200ul的50%乙腈/水稀释后上制备液相,流动相为0.1%TFA的水和乙腈,从10%-90%全梯度洗脱,在3min就出来一个大峰,后面就什么都没有了,按理说我这个样品极性比较小,为什么刚开始就冲出来了,是不是根本就没有挂在柱子上,现在就是不知道应该怎么溶解样品,把它分离纯化出来。求解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
呵呵,小叶。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-11 10:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simi6948

禁言 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励应助交流 2014-04-13 08:56:40
本帖内容被屏蔽

3楼2014-04-11 13:48:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by simi6948 at 2014-04-11 13:48:08
换试剂溶解了 可以的呢

换DMF吗,需要用什么稀释吗
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
4楼2014-04-11 16:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by simi6948 at 2014-04-11 13:48:08
换试剂溶解了 可以的呢

换DMF吗,需要用什么稀释吗
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
5楼2014-04-11 16:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simi6948

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2014-04-11 17:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分离高手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-04-13 08:57:00
应该是醋酸的原因   你的柱子是不是C18或者C8的填料  我感觉分离碱性的多肽不是很合适。换个填料试试吧
7楼2014-04-13 07:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

512303519

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yxh710: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-14 14:27:55
酸的量太多,你的样品在柱子上没有保留,随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的,建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解,然后再用酸适当调节ph值,不知道有没有帮助。
8楼2014-04-13 08:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 分离高手 at 2014-04-13 07:05:59
应该是醋酸的原因   你的柱子是不是C18或者C8的填料  我感觉分离碱性的多肽不是很合适。换个填料试试吧

谢谢啦,主要实验室就在只有C18和C8的柱子
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
9楼2014-04-14 14:24:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 512303519 at 2014-04-13 08:56:56
酸的量太多,你的样品在柱子上没有保留,随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的,建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解,然后再用酸适当调节ph值,不知道有没有帮助。

流动相稀释过多的话就会容易析出,是说先用醋酸溶剂后用氨水调节ph再进样试试吗,适当调节PH范围有具体要求吗,这个肽的ph为10.82左右,谢谢啦
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
10楼2014-04-14 14:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yxh710 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 3/150 2026-09-14 18:01 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.5.4,科目齐全,可+急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:49 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI一区文章,我:8O5.5.1.O5.4,科目全,可伽急 +4 s3fFTmArrBt6 2026-09-14 4/200 2026-09-14 17:25 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可伽急 +3 LwdutQ8HoqWP 2026-09-13 4/200 2026-09-14 16:13 by Aj1rhIDL5ixY
[教师之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:48 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:45 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O.5.5.1O.54,科目全,可十急 +4 3n8v2C8RimXI 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:37 by Aj1rhIDL5ixY
[找工作] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +5 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:21 by Aj1rhIDL5ixY
[考博] 售SCI文章,我:8O5.5.1.O.54,科目齐全,可+急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:13 by Aj1rhIDL5ixY
[硕博家园] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 15:09 by Aj1rhIDL5ixY
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8O.55.1.O.54,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 15:01 by Aj1rhIDL5ixY
[公派出国] 售SCI一区T0P文章,我:8.O55.1.O.54,科目全,可十急 +4 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 6/300 2026-09-14 15:00 by Aj1rhIDL5ixY
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 14:57 by Aj1rhIDL5ixY
[基金申请] 求教各位大神:2026教育部人文社科青年基金项目何时公示呀? +5 云宴山人 2026-09-10 7/350 2026-09-14 12:11 by ecnu2013
[博后之家] 售SCI一区T0P文章,我:8.O.55.1.O.5.4,科目全,可+急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 3/150 2026-09-14 10:11 by 23jxep3nCNZb
[考研] 售SCI一区文章,我:8.O.551.O.5.4,科目全,可伽急 +3 QUjhNVAcOSff 2026-09-13 4/200 2026-09-14 10:01 by 23jxep3nCNZb
[考博] 西北工业大学材料学院电化学传感与催化课题组招收2027年推免研究生、博士生、博士后 +3 马方园 2026-09-10 4/200 2026-09-14 09:29 by Chem张zz
[教师之家] 浙江师范大学是怎么坑我的 +10 recruit123 2026-09-09 15/750 2026-09-13 10:45 by seaskyy
[有机交流] 科研求助 10+4 我吃一只鱼 2026-09-07 4/200 2026-09-10 08:32 by 0940628
信息提示
请填处理意见