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小木虫论坛-学术科研互动平台 » 生物医药区 » 药学 » 生物制药 » 制备液相分离纯化样品溶解问题
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yxh710

金虫 (小有名气)

[求助] 制备液相分离纯化样品溶解问题 已有5人参与

一个全保护的多肽，含有20个氨基酸，显碱性，疏水性的片段，不溶于乙腈，甲醇，水，溶于DMF，醋酸，但是加一定比例的乙腈/水很容易析出，取2mg的样品用200ul的醋酸溶解后用200ul的50%乙腈/水稀释后上制备液相，流动相为0.1%TFA的水和乙腈，从10%-90%全梯度洗脱，在3min就出来一个大峰，后面就什么都没有了，按理说我这个样品极性比较小，为什么刚开始就冲出来了，是不是根本就没有挂在柱子上，现在就是不知道应该怎么溶解样品，把它分离纯化出来。求解
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有时候你生活里最想要的东西一直在你身边，可是到最后，发现也晚了
1楼 2014-04-11 10:20:37
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512303519

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与，应助指数 +1
yxh710: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-14 14:27:55
酸的量太多，你的样品在柱子上没有保留，随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的，建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解，然后再用酸适当调节ph值，不知道有没有帮助。
赞一下 回复此楼
8楼2014-04-13 08:56:56
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shale1983

铁杆木虫 (正式写手)
商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
呵呵，小叶。

[ 发自小木虫客户端 ]
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2楼2014-04-11 10:45:30
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simi6948

禁言 (小有名气)
★
感谢参与，应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励应助交流 2014-04-13 08:56:40
本帖内容被屏蔽
3楼2014-04-11 13:48:08
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yxh710

金虫 (小有名气)
引用回帖:
3楼: Originally posted by simi6948 at 2014-04-11 13:48:08
换试剂溶解了 可以的呢

换DMF吗，需要用什么稀释吗
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有时候你生活里最想要的东西一直在你身边，可是到最后，发现也晚了
4楼2014-04-11 16:33:35
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