24小时热门版块排行榜    

查看: 2369  |  回复: 13

yxh710

金虫 (小有名气)

[求助] 制备液相分离纯化样品溶解问题 已有5人参与

一个全保护的多肽,含有20个氨基酸,显碱性,疏水性的片段,不溶于乙腈,甲醇,水,溶于DMF,醋酸,但是加一定比例的乙腈/水很容易析出,取2mg的样品用200ul的醋酸溶解后用200ul的50%乙腈/水稀释后上制备液相,流动相为0.1%TFA的水和乙腈,从10%-90%全梯度洗脱,在3min就出来一个大峰,后面就什么都没有了,按理说我这个样品极性比较小,为什么刚开始就冲出来了,是不是根本就没有挂在柱子上,现在就是不知道应该怎么溶解样品,把它分离纯化出来。求解
回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐,对您同样有帮助:

有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

shale1983

铁杆木虫 (正式写手)

商家已经主动声明此回帖可能含有宣传内容
呵呵,小叶。

[ 发自小木虫客户端 ]
2楼2014-04-11 10:45:30
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simi6948

禁言 (小有名气)


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 应助指数-1, 鼓励应助交流 2014-04-13 08:56:40
本帖内容被屏蔽

3楼2014-04-11 13:48:08
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by simi6948 at 2014-04-11 13:48:08
换试剂溶解了 可以的呢

换DMF吗,需要用什么稀释吗
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
4楼2014-04-11 16:33:35
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
3楼: Originally posted by simi6948 at 2014-04-11 13:48:08
换试剂溶解了 可以的呢

换DMF吗,需要用什么稀释吗
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
5楼2014-04-11 16:33:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

simi6948

禁言 (小有名气)

本帖内容被屏蔽

6楼2014-04-11 17:11:24
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

分离高手

新虫 (小有名气)

【答案】应助回帖


感谢参与,应助指数 +1
辣笔v小新: 金币+1, 鼓励应助交流 2014-04-13 08:57:00
应该是醋酸的原因   你的柱子是不是C18或者C8的填料  我感觉分离碱性的多肽不是很合适。换个填料试试吧
7楼2014-04-13 07:05:59
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

512303519

新虫 (初入文坛)

【答案】应助回帖

★ ★ ★
感谢参与,应助指数 +1
yxh710: 金币+3, ★★★很有帮助 2014-04-14 14:27:55
酸的量太多,你的样品在柱子上没有保留,随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的,建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解,然后再用酸适当调节ph值,不知道有没有帮助。
8楼2014-04-13 08:56:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
7楼: Originally posted by 分离高手 at 2014-04-13 07:05:59
应该是醋酸的原因   你的柱子是不是C18或者C8的填料  我感觉分离碱性的多肽不是很合适。换个填料试试吧

谢谢啦,主要实验室就在只有C18和C8的柱子
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
9楼2014-04-14 14:24:56
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

引用回帖:
8楼: Originally posted by 512303519 at 2014-04-13 08:56:56
酸的量太多,你的样品在柱子上没有保留,随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的,建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解,然后再用酸适当调节ph值,不知道有没有帮助。

流动相稀释过多的话就会容易析出,是说先用醋酸溶剂后用氨水调节ph再进样试试吗,适当调节PH范围有具体要求吗,这个肽的ph为10.82左右,谢谢啦
有时候你生活里最想要的东西一直在你身边,可是到最后,发现也晚了
10楼2014-04-14 14:27:37
已阅   回复此楼   关注TA 给TA发消息 送TA红花 TA的回帖
相关版块跳转 我要订阅楼主 yxh710 的主题更新
最具人气热帖推荐 [查看全部] 作者 回/看 最后发表
[基金申请] 明天应该可查了!? +4 chengyan1220 2026-08-23 4/200 2026-08-24 08:47 by gloomy6159
[基金申请] 范进中举一文的中心思想 +5 炎黄贵胄 2026-08-22 6/300 2026-08-24 06:34 by sincosx
[基金申请] 建议基金发布提前给出明确的时间点 +11 kulium 2026-08-21 14/700 2026-08-24 02:12 by 流流伤
[基金申请] 让我中一个面上吧! +12 大萍1987 2026-08-20 15/750 2026-08-23 20:44 by 大萍1987
[教师之家] 跳槽后在研项目怎么办? +5 简单化xn 2026-08-22 10/500 2026-08-23 12:38 by 简单化xn
[基金申请] 93BebMhtakh前后11位开头都是大写 +7 且听虎啸 2026-08-17 8/400 2026-08-22 21:55 by 医学老男孩
[基金申请] 只有每年这种时候来逛逛小木虫 +24 yaoyewhu2008 2026-08-20 26/1300 2026-08-22 17:43 by kammury
[基金申请] 人气不行了 +8 fansofjerry 2026-08-21 8/400 2026-08-22 16:30 by zyqchem
[基金申请] 今天基金会出结果吗?20260819 +16 kkkl_v 2026-08-19 17/850 2026-08-22 16:12 by 阿布Abu
[基金申请] 放榜前的不淡定 40+4 snowwithsea 2026-08-19 14/700 2026-08-21 23:51 by cratir
[基金申请] 今日不放榜?网传国自然预计 8 月 27 日可查结果 +16 医学老男孩 2026-08-20 20/1000 2026-08-21 21:13 by Ldrop2023
[基金申请] 科研孤儿太难了 +17 我4大白菜 2026-08-20 18/900 2026-08-21 20:57 by zhangev
[基金申请] 看来今天不会放榜了? +8 chengyan1220 2026-08-21 11/550 2026-08-21 17:52 by dcqxinyang
[基金申请] 时间戳又变了 +13 wuchongjun 2026-08-20 19/950 2026-08-21 17:21 by 紫杉醇
[基金申请] 我面上完蛋了 +7 且听虎啸 2026-08-20 8/400 2026-08-21 12:31 by 酷酷墨镜
[论文投稿] 投稿咨询 +5 wwm09 2026-08-17 7/350 2026-08-21 10:11 by 期刊论文帮手
[基金申请] 今天放榜没戏了吧 +9 yuleib84 2026-08-19 11/550 2026-08-21 10:06 by gltch
[基金申请] 重要消息,中午系统在维护 +11 yuleib84 2026-08-18 12/600 2026-08-20 11:09 by xskun
[基金申请] 明天放榜? +5 Shxjjxjkx 2026-08-18 5/250 2026-08-18 18:14 by -大大大大大-
[基金申请] 今天维护系统维护 祝所有人 高中 +8 gjjjzhong 2026-08-18 9/450 2026-08-18 13:01 by 家与远方
信息提示
请填处理意见