24小时热门版块排行榜

返回列表

当前只显示满足指定条件的回帖，点击这里查看本话题的所有回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 854.1
帖子: 179
在线: 74.8小时
虫号: 1677056
注册: 2012-03-09
性别: MM
专业: 生物技术药物

[求助] 制备液相分离纯化样品溶解问题已有5人参与

一个全保护的多肽，含有20个氨基酸，显碱性，疏水性的片段，不溶于乙腈，甲醇，水，溶于DMF，醋酸，但是加一定比例的乙腈/水很容易析出，取2mg的样品用200ul的醋酸溶解后用200ul的50%乙腈/水稀释后上制备液相，流动相为0.1%TFA的水和乙腈，从10%-90%全梯度洗脱，在3min就出来一个大峰，后面就什么都没有了，按理说我这个样品极性比较小，为什么刚开始就冲出来了，是不是根本就没有挂在柱子上，现在就是不知道应该怎么溶解样品，把它分离纯化出来。求解

回复此楼

» 猜你喜欢

» 本主题相关价值贴推荐，对您同样有帮助:

液相制备纯化合物问题已经有10人回复
采用液相分析水溶性不佳化合物不准求助已经有3人回复
疏水性多肽片段如何让分离纯化已经有4人回复
有关制备型液相色谱的应用~~~ 已经有7人回复
如何用反相高效液相色谱法分离几个极性较大，分子量差别不是很大的物质已经有6人回复
抗氧化活性成分的分离纯化已经有20人回复
凝胶过滤色谱与高效液相色谱的区别，这两个色谱在分离纯化多肽时有何优缺点？已经有18人回复
弱极性物质的反相液相色谱已经有4人回复
甲醇和乙腈对化合物的溶解性和什么有关已经有5人回复
液相制备时，样品的溶解问题已经有6人回复
关于制备液相柱子的选择（色素样品）已经有5人回复
关于高效液相色谱样品溶解已经有8人回复
上几张高效液相色谱的谱图，各位高人帮助分析一下前面的负峰原因，谢谢已经有13人回复
可否用DMSO溶解样品上中压液相？已经有4人回复
用高效液相制备，样品溶解度很差怎么办已经有6人回复
液相色谱做一样品就发现分离效果不好？？已经有5人回复
天然产物分离纯化问题交流已经有16人回复
旋转蒸干后样品不好溶，不好转移样品了？已经有15人回复
【求助】三乙胺盐酸盐在甲醇中的溶解度已经有8人回复
【资源】转：反相制备型高效液相色谱法分离纯化过程中的共性问题已经有36人回复

有时候你生活里最想要的东西一直在你身边，可是到最后，发现也晚了

1楼 2014-04-11 10:20:37

已阅回复此楼关注TA 给TA发消息送TA红花 TA的回帖

yxh710

金虫 (小有名气)

应助: 0 (幼儿园)
金币: 854.1
帖子: 179
在线: 74.8小时
虫号: 1677056
注册: 2012-03-09
性别: MM
专业: 生物技术药物

引用回帖:

8楼: Originally posted by 512303519 at 2014-04-13 08:56:56
酸的量太多，你的样品在柱子上没有保留，随醋酸峰带了出来。按道理20肽保留时间不会那么短的，建议继续用流动相稀释。之前我们遇到这现象可以加适量氨水溶解，然后再用酸适当调节ph值，不知道有没有帮助。

流动相稀释过多的话就会容易析出，是说先用醋酸溶剂后用氨水调节ph再进样试试吗，适当调节PH范围有具体要求吗，这个肽的ph为10.82左右，谢谢啦