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yiye1220

新虫 (小有名气)

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[求助] 大肠杆菌中表达包涵体已有1人参与

在利用大肠杆菌生产重组抗原的过程中遇到以下问题：
1.目的蛋白为包涵体，呈现絮状粘稠状，和正常颗粒状状态不同，是何种原因？
2.发酵后菌体发黑，是什么原因，对后续试验有何影响
3。培养包涵体有哪些注意事项
4。每次试验配置培养基都一样，会是培养基原因导致1,2两种情况吗

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1楼 2014-04-09 10:50:16

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【答案】应助回帖

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yiye1220: 金币+20, ★★★很有帮助 2014-12-01 10:03:45

首先确定目标蛋白在你要的沉淀中，然后你的沉淀是呈絮状的？
第二，细胞的破碎方式，是高压均质破碎还是超声破碎的？
第三，发酵菌体发黑，是放置时间的问题还是收集后就有黑色？
第四，对于包涵体表达来说，菌体的质量控制比较重要，诱导时候的OD值以及诱导的时间都是至关重要的。当然培养基会对发酵产生影响。这些都是个人经验和观点。。。。

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